nm23-H1介导的MMP-2/MMP-9表达异常在EMs发生发展中的作用机制

发布时间：2022-12-23 13:11

　　背景:子宫内膜异位症（EMs）是一种发生于育龄妇女的雌激素依赖性妇科疾病,其致病机制尚不清楚。该病虽是良性疾病,却具有恶性肿瘤浸润和转移的特点。nm23-H1是一个重要的肿瘤转移抑制基因,且受雌激素的调节。nm23-H1在抑制肿瘤侵袭转移过程中能通过RAS-RAF-MEK-ELK1通路、或P3K-AKT-NF-κB/AP-1通路、或RAS–RAC–MKK3/6-p38通路,降低MMP-9和MMP-2的表达,增强TIMP的表达,最终减弱肿瘤细胞的转移能力。研究表明在EMs异位内膜中MMP-2/9（金属基质蛋白酶2/9）的表达有显著性变化,为进一步明确nm23-H1与EMs发生发展的相关性及其是否通过调节MMP-2/9的表达促进EMs发生发展,通过q RT-PCR、细胞培养和si RNA转染等探索MMP-2,MMP-9基因表达跟nm23-H1及EMs的相关性及具体作用机制。通过以上实验研究,将基本明确nm23-H1在EMs发生中的作用,试图明确具体作用通路,为EMs的治疗提供新的靶标。目的:探讨nm23-H1和子宫内膜异位症之间的关系,试图探索nm23-H1介导的MMP-2/MMP-9表达... 

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
前言
研究内容与法
    1 研究内容
    2 材料与方法
        2.1 实验材料
            2.1.1 标本采集
            2.1.2 实验所需主要试剂
            2.1.3 实验耗材及仪器设备
        2.2 实验方法
            2.2.1 实验相关试剂配制及器械的处理
            2.2.2 组织的消化和细胞培养
                2.2.2.1 细胞的原代培养
                2.2.2.2 细胞计数
                2.2.2.3 细胞传代培养
                2.2.2.4 细胞的冻存与复苏
            2.2.3 免疫细胞化学
            2.2.4 siRNA设计、片段的筛选及条件优化
                2.2.4.1 siRNA片段设计
                2.2.4.2 siRNA转染条件优化
                    2.2.4.2.1 阴性荧光对照转染
                    2.2.4.2.2 GAPDH阳性对照转染条件优化
                2.2.4.3 siRNA片段的选择
            2.2.5 雌激素刺激下的nm23-H1、MMP-9和MMP-2的表达
            2.2.6 siRNA转染抑制nm23-H1表达
            2.2.7 qRT-PCR实验
                2.2.7.1 细胞中总RNA的提取
                2.2.7.2 RNA浓度与纯度的检测
                2.2.7.3 qRT-PCR对目的基因的检测
    3.统计方法
结果
讨论
参考文献
综述
    参考文献
作者简介及读研期间主要科研成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]子宫内膜异位症组织中MMP-2和MMP-9基因表达的意义[J]. 孔丽娜,孙青,李书勤,罗永红,李铁臣,卢林明.  中国病理生理杂志. 2007(02)
[2]子宫内膜异位症中nm23-H1基因表达的意义[J]. 李铁臣,孔丽娜,孙青,罗永红,卢林明.  中国病理生理杂志. 2007(01)
[3]子宫内膜异位症中膜型1-基质金属蛋白酶和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1表达的研究[J]. 孔丽娜,孙青,李书勤,李铁臣,卢林明.  中国实用妇科与产科杂志. 2006(05)
[4]nm23-H1基因在人肺癌细胞L9981恶性表型逆转中的作用[J]. 车国卫,周清华,王艳萍,刘伦旭,覃杨,孙芝琳,孙泽芳,陈晓禾.  生物医学工程学杂志. 2005(03)
[5]子宫内膜异位症与肿瘤转移基因关系的研究进展[J]. 孙青,孔丽娜.  国外医学.遗传学分册. 2004(03)
[6]子宫内膜异位症的研究与设想[J]. 郎景和.  中华妇产科杂志. 2003(08)

博士论文
[1]c-fos和MMP-9在子宫内膜异位症发病中的作用研究[D]. 潘虹.浙江大学 2008



本文编号：3725156