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IRE联合细胞同步化对Hela细胞消融作用伴G2/M期阻滞的实验研究

发布时间:2023-09-16 19:19
  目的:探索不可逆电穿孔及脉冲电场联合细胞周期同步化对Hela细胞的消融作用,初步了解脉冲电场引起Hela细胞G2/M期阻滞的机制。方法:实验组为1.75 k V/cm、2.0 k V/cm、2.25 k V/cm、2.5 k V/cm,加对照组,共5组,脉冲参数为脉宽100μs,频率1 Hz,脉冲数8个。采用洛伐他汀同步G1期,羟基脲同步S期和G2/M期,流式细胞术检测确认。Hela细胞及同步各细胞周期的细胞进行电穿孔,6小时及12小时流式细胞术检测细胞周期情况;24小时后流式细胞术及荧光显微镜检测细胞凋亡情况;CCK-8 24小时后检测细胞活力;CCK-8连续检测7天测各组细胞电场处理后的增殖与活力(场强2.5k V/cm)。Hela细胞及同步各细胞周期的细胞进行场强为2.5 k V/cm的电场处理,14天吉姆萨染色观察克隆形成情况。Western Blot检测G2/M期细胞周期蛋白,初步了解脉冲电场引起Hela细胞G2/M期阻滞的相关机制。结果:(1)Lov作用24 h,可获取G1期细胞(83.39±3.91)%;HU作用24 h,弃去HU,继续培养3.5 h可获取S期细胞(82....

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