褪黑素联合卡铂对卵巢癌SKOV3细胞抑制及凋亡作用的研究

发布时间：2017-05-22 20:11

  本文关键词：褪黑素联合卡铂对卵巢癌SKOV3细胞抑制及凋亡作用的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究背景： 卵巢癌(OC)是发病率仅次于宫颈癌及子宫内膜癌的三大女性恶性生殖系统肿瘤之一，对女性的健康、生命造成严重威胁，其死亡率占恶性肿瘤的首位。关于卵巢癌患者的治疗，国内外学者采用的标准治疗方法是肿瘤细胞减灭术和以铂类为基础的联合化疗，但根据相关数据，患者术后复发、转移率仍较高。 卡铂（CBP）1980年由Clear等发现，属于第二代铂类抗癌药物，其不良反应：肾毒性、耳毒性、消化道反应等均较顺铂的发生率低，但是有研究表明，卡铂的抗肿瘤范围窄，并且其副作用及耐药性限制了临床的药物剂量，因此寻找抑制并消灭肿瘤细胞的、并对卡铂等化疗药物有增敏作用的辅助药物成为近几年卵巢癌研究的热点。 褪黑素（MLT）由松果体分泌，它是一种吲哚类激素，与人类的日常生理活动相关，具有调节生物节律、参与抗氧化及免疫系统、帮助睡眠等作用。同时能通过多种途径发挥抑制实体肿瘤的作用，如乳腺癌、前列腺癌、膀胱癌、胰腺癌等。褪黑素作为化疗辅助药物，其和卡铂的联合应用是否会增强对卵巢癌细胞的杀伤、抑制肿瘤细胞增殖的作用，减少卡铂的用量，是本文研究的问题，为卵巢癌治疗提供了新的途径。 目的： 褪黑素（MLT）联合卡铂（CBP）对卵巢癌SKOV3细胞体外培养，抑制增殖及促进凋亡作用的研究方法： (1)MTT比色法检测褪黑素、卡铂单独及联合应用对人卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制的作用。 (2)流式细胞仪（FCM）检测对褪黑素、卡铂单独及联合应用对SKOV3细胞增殖凋亡的影响。 (3)逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测褪黑素、卡铂单独及联合应用对人卵巢癌SKOV3细胞中Bcl-2、Bax基因表达的影响。 结果： (1)褪黑素、卡铂单独应用时对卵巢癌SKOV3细胞的增殖有抑制效应，呈一定的浓度依赖性，褪黑素与卡铂联合应用时，与卡铂单用组比较，联合应用组抑制率高于卡铂单用组，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。 (2)褪黑素、卡铂单独应用时可以抑制卵巢癌细胞SKOV3细胞的体外增殖，促进其凋亡，，并呈一定的浓度依赖性，褪黑素与卡铂联合应用时，与卡铂单用组比较，联合应用组凋亡率高于卡铂单用组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。 (3)褪黑素、卡铂单独应用时可增加Bax基因的表达、降低Bcl-2基因的表达，联合应用时可明显增加Bax基因的表达，明显降低Bcl-2基因的表达，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。 （4）褪黑素联合卡铂与单独应用卡铂相比较，减少卡铂的用量，可达到相同的抑制增值及促进凋亡作用 结论： (1)褪黑素、卡铂单独作用均可抑制SKOV-3细胞的增殖、诱导SKOV-3细胞凋亡，但两者联合应用时抑制率及凋亡率明显高于单独用药。 (2)褪黑素、卡铂单独作用可增加SKOV-3细胞的Bax基因表达，降低Bcl-2基因的表达，联合应用时可明显增加Bax基因的表达，明显降低Bcl-2基因的表达。 (3)褪黑素联合卡铂与单独应用卡铂相比较，减少卡铂的用量，可达到相同的抑制增值及促进凋亡作用。
【关键词】：褪黑素 联合 卡铂 卵巢癌 凋亡
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.31
【目录】：

• 中文摘要4-6
• ABSTRACT6-11
• 英文缩写对照表11-12
• 第1章 引言12-14
• 第2章 材料与方法14-23
• 2.1 实验材料14-16
• 2.1.1 细胞系14
• 2.1.2 主要试剂14-15
• 2.1.3 主要实验器材15-16
• 2.2 实验方法及步骤16-23
• 2.2.1 药物、试剂配置16
• 2.2.2 细胞培养16-17
• 2.2.3 实验分组17-18
• 2.2.4 MTT 比色法检测褪黑素、卡铂单独及联合应用对人卵巢癌SKOV3 细胞的增殖抑制的作用18
• 2.2.5 流式细胞仪检测褪黑素、卡铂单独及联合应用对人卵巢癌 SKOV3 细胞凋亡的影响18-19
• 2.2.6 RT-PCR 检测褪黑素、卡铂单独及联合应用对卵巢癌 SKOV-3 细胞 Bcl-2、Bax 的表达19-22
• 2.2.7 数据统计分析22-23
• 第3章 结果23-30
• 3.1 MTT 比色结果23-24
• 3.1.1 褪黑素联合卡铂对卵巢癌 SKOV3 细胞的增殖抑制作用强于单独应用卡铂23
• 3.1.2 褪黑素联合卡铂与单独应用卡铂相比较，减少卡铂的用量，可达到相同的抑制细胞增殖作用23-24
• 3.2 流式细胞仪检测结果24-26
• 3.2.1 褪黑素联合卡铂对卵巢癌 SKOV3 细胞的促进凋亡作用强于单独应用卡铂24
• 3.2.2 褪黑素联合卡铂与单独应用卡铂相比较，减少卡铂的用量，可达到相同的促进凋亡作用24-26
• 3.3 RT-PCR 检测结果26-30
• 第4章 讨论30-34
• 4.1 MLT 联合 CBP 对人卵巢癌 SKOV3 细胞的作用31-32
• 4.2 MLT 诱导肿瘤细胞凋亡的可能分子机制32-33
• 4.3 褪黑素对铂类药物的协同作用33-34
• 第5章 结论34-35
• 参考文献35-38
• 综述38-46
• 参考文献43-46
• 作者简介及在学期间所取得的科研成果46-47
• 致谢47

【参考文献】

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本文编号：386747