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敲降TMEM45A基因对卵巢癌细胞增殖和侵袭能力的影响

发布时间:2025-04-01 02:15
  目的:通过对靶基因TMEM45A进行敲降,观察其对卵巢癌细胞系细胞增殖、粘附、侵袭等生物学行为的影响;通过对TMEM45A基因进行富集分析,寻找与TMEM45A相关信号通路。本研究旨在阐明TMEM45A对卵巢癌细胞系细胞增殖、侵袭能力的调节作用,并进一步探索其可能的信号途径。方法:通过分析TCGA数据库卵巢癌组RNA测序数据和25对卵巢癌及其配对非癌组织样本的实时PCR数据,我们比较了卵巢癌组织和正常组织中TMEM45A的表达,并通过在两种卵巢癌细胞系HO-8910和A2780中进行RNA干扰,抑制TMEM45A的表达;同时使用CCK-8(ell Counting Kit-8 assay)、PI染色(propidium iodide staining)、细胞黏附和Tramswell实验检测细胞增殖、细胞周期分布、黏附和侵袭能力。采用GSEA软件对该基因进行富集分析发现TGF-β信号传导途径和粘着斑途径与TMEM45A的高表达具有显著相关性,选择上述可能相关信号通路中的关键基因:转化生长因子-β(TGF-β1和TGF-β2),Ras同源家族成员A(RhoA)和Rho相关激酶2(ROCK2)...

【文章页数】:48 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图1:卵巢癌组织RNA测序结果

图1:卵巢癌组织RNA测序结果

之间有显著差异(P<0.001)(见图2)。根据以上结果,我们考虑TMEM45A基因可能在卵巢癌组织中具有重要作用我们设计了后续实验,通过siRNA干扰卵巢癌细胞中的TMEM45A基因,观察卵巢胞的增殖、侵袭、细胞分布等变化情况。


图2:TMEM45AmRNA在卵巢癌组织中的表达情况

图2:TMEM45AmRNA在卵巢癌组织中的表达情况

之间有显著差异(P<0.001)(见图2)。根据以上结果,我们考虑TMEM45A基因可能在卵巢癌组织中具有重要作用我们设计了后续实验,通过siRNA干扰卵巢癌细胞中的TMEM45A基因,观察卵巢胞的增殖、侵袭、细胞分布等变化情况。


图3:敲降TMEM45A影响HO-8910、A2780细胞系细胞增殖情况

图3:敲降TMEM45A影响HO-8910、A2780细胞系细胞增殖情况

表达水平明显下降,其中TMEM45A-Ri-3的干扰效果最好,因此我实验研究(见图3)。


图4CCK-8检测TMEM45A-Ri-3基因敲降影响卵巢癌细胞增殖情况A:TMEM45A-Ri-3影响A2780细胞系TMEM45A增殖情况;B:TMEM45A-Ri-3影响HO-8910细胞系TMEM45A增殖情况

图4CCK-8检测TMEM45A-Ri-3基因敲降影响卵巢癌细胞增殖情况A:TMEM45A-Ri-3影响A2780细胞系TMEM45A增殖情况;B:TMEM45A-Ri-3影响HO-8910细胞系TMEM45A增殖情况

图4CCK-8检测TMEM45A-Ri-3基因敲降影响卵巢癌细胞增殖情况A:TMEM45A-Ri-3影响A2780细胞系TMEB:TMEM45A-Ri-3影响HO-8910细胞系TMEM45A增殖情况



本文编号:4038786

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