补中益气汤对TGFβ-3及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的影响及其治疗POP的机制研究

发布时间：2017-05-30 00:13

  本文关键词：补中益气汤对TGFβ-3及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的影响及其治疗POP的机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的采用细胞分子生物学实验的方法,研究补中益气汤对盆腔脏器脱垂的作用机制。通过对比盆腔脏器脱垂患者与正常对照组子宫主骶韧带中TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA表达情况,明确TGFβ-3、COL1A1、COL3A1能否作为判定相关治疗是否有效的评价指标。并通过体外细胞培养、给药,检测分析TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA的表达情况,探讨补中益气汤治疗盆腔脏器脱垂的可能机制,以及应用补中益气汤治疗盆腔脏器脱垂的可能性,为临床上补中益气汤治疗盆腔脏器脱垂提供理论依据。方法1.选取40例行经腹或经阴道子宫全切患者,其中符合中、西医诊断标准盆腔脏器脱垂患者20例为研究组,非卵巢功能性肿瘤及宫颈上皮内瘤变患者20例为正常对照组。术中取子宫主韧带、骶韧带各1cm*1cm,经液氮充分研磨后提取组织RNA,实时荧光定量测定TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA的表达,并进行统计学分析。2.选取非卵巢功能性肿瘤及宫颈上皮内瘤变需行经腹子宫全切患者1例,术中采集子宫骶韧带约1cm*1cm,进行原代细胞培养,待细胞培养至第4代时,于培养基中加入浓度分别为20g/L、10g/L、5g/L、2.5g/L、1.25g/L、0.625g/L、0.3125g/L的补中益气汤。每个浓度重复3孔。加药后第4天取加药组及对照组细胞,提取c DNA,实时荧光定量测定TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA的表达,并进行统计学分析。结果组织RNA检测结果:TGFβ-3:POP组主骶韧带中TGFβ-3 m RNA表达水平明显高于正常对照组;COL1A1:POP组主骶韧带中COL1A1 m RNA表达水平明显低于正常对照组;COL3A1:POP组主骶韧带中COL3A1 m RNA表达水平明显低于正常对照组。差异均有统计学意义(P0.01)。主韧带组与骶韧带组TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA的表达无明显差异,差异无统计学意义(P0.05)。成纤维细胞RNA检测结果:给药后所有浓度TGFβ-3、COL1A1、COL3A1m RNA的表达均较空白对照组上升明显,且差异均有统计学意义(P0.01)。且随着浓度的上升,TGFβ-3、COL1A1、COL3A1m RNA的表达亦上升,浓度增加至2.5g/L时,3种因子的表达达峰值。随着浓度的继续升高,3种因子的表达随之下降,但仍高于空白对照组。且补中益气汤对TGFβ-3与COL1A1、COL3A1的调节作用相似。结论1.TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA的表达在盆腔脏器脱垂患者与正常对照组子宫主骶韧带中表达存在显著差异,说明此三者与盆腔脏器脱垂存在密切关系,可以作为判定补中益气汤对盆腔脏器脱垂患者治疗是否有效的可靠指标。2.补中益气汤对盆腔脏器脱垂的治疗作用可能与调节TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA的表达有关。但其具体作用靶点和机制尚需进一步研究。3.单独应用补中益气汤具有一定的可行性,临床上可以通过大样本的临床试验对此结论进行考证。
【关键词】：盆腔脏器脱垂 补中益气汤 转化生长因子β-3 Ⅰ型胶原蛋白 Ⅲ型胶原蛋白
【学位授予单位】：湖北中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R711.2
【目录】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 缩略词表10-11
• 前言11-14
• 1TGFβ-3、COL1A1、COL3A1在盆腔脏器脱垂患者子宫主骶韧带中的表达情况14-20
• 1.1 临床资料14-16
• 1.2 实验研究16-20
• 2 补中益气汤对子宫骶韧带成纤维细胞TGFβ-3、COL1A1、COL3A1表达的影响20-30
• 2.1 取材20
• 2.2 仪器与试剂20-22
• 2.3 试剂及药物制备22
• 2.4 试验方法22-24
• 2.5 结果24-30
• 讨论30-40
• 1 课题设计的现代医学背景30-36
• 1.1 发病因素30-31
• 1.2 胶原蛋白与POP31-34
• 1.3 TGFβ与POP34-35
• 1.4 治疗35-36
• 2 课题设计的中医理论基础36-38
• 2.1 病因病机36
• 2.2 辨证施治36-37
• 2.3 补中益气汤与POP37-38
• 3 本课题创新之处38-39
• 4 本课题相关问题及进一步研究39-40
• 结语40-41
• 参考文献41-48
• 附录 文献综述48-60
• 参考文献55-60
• 致谢60

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