Let-7i抑制人卵巢癌SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭

发布时间：2017-07-18 07:03

  本文关键词：Let-7i抑制人卵巢癌SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭

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【摘要】：目的 :探讨let-7i对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭和顺铂(cisplatin,DDP)耐药性的影响及可能的作用机制。方法:应用实时荧光定量PCR检测人永生化卵巢细胞IOSE、卵巢癌SKOV3细胞和卵巢癌DDP耐药细胞SKOV3/DDP中let-7i的表达。将let-7i过表达质粒(let-7i)、抑制let-7i表达质粒(anti-let-7i)和阴性对照(negative control,NC)质粒(let-7i-NC)分别转染SKOV3细胞后,应用Ed U(5-ethynyl-2’-deoxyuridine)实验、划痕愈合实验和Transwell侵袭实验分别检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。用不同浓度的DDP处理转染了let-7i质粒的SKOV3/DDP细胞后,MTT法检查SKOV3/DDP细胞对DDP敏感性的变化。应用Target Scan、mi Randa和Pic Tar靶基因预测软件以及DAVI(D Database for Annotation,Visualization and Integrated Discovery)数据库对let-7i进行生物信息学分析,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测let-7i和anti-let-7i转染组SKOV3细胞中let-7i潜在靶基因Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)m RNA和蛋白的表达水平。结果 :SKOV3细胞中let-7i的表达水平低于IOSE细胞(P0.01),而SKOV3/DDP细胞中let-7i的表达水平低于SKOV3细胞(P0.01)。Let-7i转染组SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭能力下降(P0.05、P0.01和P0.05),而anti-let-7i转染组SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力的改变不显著(P值均0.05)。转染let-7i质粒后,SKOV3/DDP细胞对DDP的敏感性增强(P0.05)。生物信息学分析表明,let-7i的靶基因主要富集于丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路、转化生长因子-β(transforming growth factor-beta,TGF-β)信号通路和黏着斑通路等。Let-7i转染组SKOV3细胞中TLR4 m RNA和蛋白的表达水平下调(P值均0.05)。结论 :卵巢癌SKOV3和SKOV3/DDP细胞中let-7i低表达。Let-7i过表达可抑制SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭能力,增强SKOV3/DDP细胞对DDP的敏感性。TLR4可能是let-7i的靶基因之一。
【作者单位】： 武汉大学基础医学院病原生物系;
【关键词】： 卵巢肿瘤 细胞增殖 肿瘤浸润 抗药性 肿瘤 Let-i
【分类号】：R737.31
【正文快照】： 方法:应用实时荧光定量PCR检测人永生化卵巢细胞IOSE、卵巢癌SKOV3细胞和卵巢癌DDP耐药细胞SKOV3/DDP中let-7i的表达。将let-7i过表达质粒(let-7i)、抑制let-7i表达质粒(anti-let-7i)和阴性对照(negative control,NC)质粒(let-7i-NC)分别转染SKOV3细胞后,应用Ed U(5-ethynyl-2

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本文编号：556478