miR-155对卵巢癌SKOV3细胞株增殖和凋亡的影响

发布时间：2017-07-30 03:18

  本文关键词：miR-155对卵巢癌SKOV3细胞株增殖和凋亡的影响

  更多相关文章： 卵巢癌 SKOV3细胞株 miR-155 caspase3 细胞增殖 细胞凋亡 RT-PCR Western bolt

【摘要】：目的:肿瘤严重威胁着人类的生命健康,卵巢癌是目前为止发现的女性生殖系统肿瘤最常见的恶性肿瘤之一[1],严重威胁着女性的健康和生命,然而由于卵巢癌发病隐匿,发现时多为晚期,同时由于没有特异的检测指标,为治疗及判断预后造成了难题。近几年来miRNA在肿瘤发生发展中的作用已成为研究热点,越来越多的研究表明miRNA与肿瘤的发生及发展过程密切相关,参与调控肿瘤细胞的凋亡、增殖、迁移等生物学行为,发挥着类似癌基因或抑癌基因的作用[2-4],本研究采用细胞培养、细胞转染、流式细胞学、实时荧光定量PCR、Western blot等方法检测miR-155和caspase3在卵巢癌SKOV3细胞株中的表达情况,探讨miR-155在卵巢癌细胞株SKOV3中的表达情况及其对caspase3表达水平的调节作用,为卵巢癌基因治疗提供理论基础,同时为卵巢癌的早期诊断和后续基因治疗提供新的视角。方法:1培养卵巢癌SKOV3细胞株。2实验分组:实验组即应用Hieff Trans脂质体转染试剂转染miR-155的过表达质粒;阴性对照组即应用Hieff Trans脂质体转染无miR-155的质粒;脂质体试剂对照组即转染Hieff Trans脂质体转染试剂组;空白对照组即不转染组。3应用MTT法检测各组卵巢癌SKOV3细胞增殖情况。4应用Annexin APC/7ADD双染法检测各组卵巢癌SKOV3细胞凋亡情况。5采用实时荧光定量PCR法检测各组卵巢癌SKOV3细胞中miR-155的表达情况。6 Western blot法检测各组卵巢癌SKOV3细胞中caspase3蛋白表达的情况。7用SPSS13.0统计软件对所有数据进行统计学分析。所有数据均以均数±标准差(x±s)方式表示,多组间均数比较采用方差分析、两组间均数比较用t检验,若方差不齐采用秩和检验,P0.05为该数据由统计学意义。结果:1 MTT法检测各组细胞增殖情况:0、24、48小时,实验组与阴性对照组、空白对照组、脂质体对照组相比细胞增殖速度相似,统计学上无显著差异;72小时,实验组与其它三组相比细胞增殖速度明显减慢,统计学上有显著差异。2 Annexin APC/7ADD双染法检各组细胞凋亡情况:细胞转染72小时后,实验组与阴性对照组、脂质体对照组及空白对照组相比细胞早期凋亡率明显升高,统计学上有显著性差异(P0.05);晚期凋亡率各组间无显著差异(P0.05)。3实时荧光定量PCR法检测各组细胞miR-155表达情况:实验组miR-155的表达量与其它各对照组相比明显升高,统计学上有显著性差异(P0.05)。4 Western blot法检测各组细胞caspase3蛋白表达情况:实验组与阴性对照组、空白对照组及脂质体对照组相比caspase3蛋白表达明显升高,统计学上有显著性差异(P0.05)。结论:1 miR-155可抑制卵巢癌细胞增殖。2说明miR-155能促进卵巢癌细胞的凋亡。3在卵巢癌细胞中miR-155对caspase3有上调作用。4在卵巢癌SKOV3细胞株中有miR-155表达,一定程度上可抑制卵巢癌细胞的增殖,并通过上调caspase3促进卵巢癌细胞的凋亡,从而调控卵巢癌的发生发展。
【关键词】：卵巢癌 SKOV3细胞株 miR-155 caspase3 细胞增殖 细胞凋亡 RT-PCR Western bolt
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.31
【目录】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 前言9-11
• 材料与方法11-21
• 结果21-23
• 附图23-26
• 附表26-28
• 讨论28-31
• 结论31-32
• 参考文献32-35
• 综述 miR-155 在妇科恶性肿瘤中的研究进展35-42
• 参考文献39-42
• 致谢42-43
• 个人简历43

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前9条

1 王晓龙;陈新涛;曲戈;马海波;马军;李印;秦建军;;miR-155在食管鳞癌中的表达及临床意义[J];中国胸心血管外科临床杂志;2015年01期

2 高玲;袁明;邹清靖;汪雯雯;栗妍;王世宣;;miR-155对子宫内膜间质细胞增殖和凋亡的影响[J];现代妇产科进展;2014年01期

3 车玉传;苏运钦;温旺荣;;miR-155-5p在宫颈癌血清中的表达及其对宫颈癌细胞的影响[J];中国病理生理杂志;2013年12期

4 应倩;夏庆民;郑荣寿;张思维;陈万青;;中国2009年宫颈癌发病与死亡分析[J];中国肿瘤;2013年08期

5 Jingjing Liu;Qixin Mao;Yan Liu;Xiaomeng Hao;Sheng Zhang;Jin Zhang;;Analysis of miR-205 and miR-155 expression in the blood of breast cancer patients[J];Chinese Journal of Cancer Research;2013年01期

6 李万春;涂频;周晓军;;MicroRNA与卵巢癌[J];医学研究生学报;2012年12期

7 葛甜甜;梁勇;付蓉;王国锦;阮二宝;瞿文;王晓明;刘鸿;吴玉红;宋嘉;王化泉;邢莉民;关晶;李丽娟;邵宗鸿;;淋巴瘤患者血浆中miR-21、miR-155、miR-210的表达及临床意义[J];中国实验血液学杂志;2012年02期

8 刘伏香;谭志琴;龙丹;戈立东;;miR-155在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义[J];中国癌症杂志;2011年09期

9 刘冲;石群立;;卵巢癌免疫标记物研究进展[J];医学研究生学报;2010年09期

，

本文编号：592305