干扰eIF4E对宫颈癌细胞的c-myc基因表达和增殖活性的影响

发布时间：2017-08-15 02:10

  本文关键词：干扰eIF4E对宫颈癌细胞的c-myc基因表达和增殖活性的影响

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【摘要】：目的检测干扰eIF4E基因对宫颈癌细胞中c-myc基因表达和增殖活性的影响,初步探讨e IF4E对宫颈癌细胞的作用机制。方法两种宫颈癌细胞C33A、Hela各分为未转染组(C33A-Mock、Hela-Mock),空载对照组(C33A-NC、Hela-NC)以及e IF4E干扰组(C33A-she IF4E、Hela-she IF4E),用阳离子脂质体Lip2000将上述质粒转染到宫颈癌细胞,收集细胞逆转录合成CDNA后采用qRT-PCR方法检测各组细胞中eIF4E和cmyc基因mRNA相对水平的变化,采用Western blot方法检测各组细胞中上述基因蛋白水平的改变,采用MTT法绘制细胞生长曲线检测各组细胞增殖活性的变化。结果与未转染组细胞相比,C33A-she IF4E细胞的e IF4E mRNA和蛋白水平分别下降(71±2.1)%和(69±2.4)%,c-myc mRNA和蛋白水平分别上调(5.6±0.7)倍和下降(60±2.5)%,细胞种板后1~3 d增殖无明显改变,第4、5、6、7天增殖抑制率分别为(62±1.7)%、(65±1.2)%、(69±1.4)%、(63±1.2)%;Hela-she IF4E细胞的eIF4E mRNA和蛋白水平分别下降(68±1.9)%和(61±2.1)%,c-myc mRNA和蛋白水平分别上调(3.4±0.2)倍和下降(53±1.5)%。结论 eIF4E基因敲减导致宫颈癌细胞c-myc的蛋白表达相应下调,同时显著抑制宫颈癌细胞增殖活性,提示e IF4E通过调控c-myc的蛋白表达进而影响宫颈癌细胞的生物学行为。
【作者单位】： 广东医科大学肿瘤研究所;广东省东莞市东城人民医院病理科;
【关键词】： eIFE c-myc 增殖 宫颈癌
【基金】：广东省医学科学研究基金项目(编号:A2015346) 广东省自然科学基金资助项目(编号:2014A030313536) 广东医学院青年基金项目(编号:XQ13006)
【分类号】：R737.33
【正文快照】： 真核细胞翻译起始因子4E(eukaryotic translation initiation factor 4E,eI F4E)是真核细胞mRNA翻译起始过程的限速因子,c-myc为转录调控蛋白,两者在宫颈癌组织中过表达且均与宫颈癌发生发展密切相关[1-4]。在NIH3T3细胞中,eI F4E和c-myc两者之间存在正反馈回路,即c-myc可转录

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本文编号：675764