下调miR-221表达抑制子宫颈癌细胞恶性生物学行为及其作用机制

发布时间：2017-08-18 01:03

  本文关键词：下调miR-221表达抑制子宫颈癌细胞恶性生物学行为及其作用机制

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【摘要】：目的:探讨下调miR-221表达对子宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响及其作用机制。方法:运用脂质体2000转染法将miR-221抑制剂和阴性对照核苷酸片段(NC)转染子宫颈癌细胞HeLa、C33A、SiHa和Caski细胞,用Western blotting和Real-time PCR分别检测ARID1A(miR-221靶蛋白)、cleaved caspase 3、caspase 3、cleaved PARP、PARP、MMP-9、MMP-13、TIMP-3蛋白表达水平和miR-221、MMP-9、MMP-13、TIMP-3 mRNA的表达水平;用MTT法、克隆形成实验、Annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞术分别测定细胞增殖、克隆形成率和细胞凋亡率。结果:与阴性对照组比较,(1)miR-221抑制剂转染的He La、CC3A、SiHa和Caski细胞miR-221表达量均显著降低[(0.23±0.01)、(0.31±0.02)、(0.34±0.01)、(0.37±0.02),F=25.44,P0.05];(2)转染的细胞随着培养时间的增加细胞存活率逐渐下降,具有时间依赖效应,48 h之后细胞存活率显著低于阴性对照组(F=37.42,P0.05);细胞的克隆形成率显著降低(F=43.58,P0.05);培养72 h时细胞凋亡率分别为:He La(27.92±3.47)%、C33A(20.84±4.31)%、Si Ha(18.81±2.18)%、Caski(19.86±3.82)%,均显著高于对照组(F=54.78,P0.05);(3)转染细胞下调miR-221表达后促进cleaved caspase 3、cleaved PARP、TIMP-3蛋白表达,抑制MMP-13蛋白表达;降低MMP-13 mRNA表达(t=37.50,P0.05),增加TIMP-3 mRNA表达(t=46.30,P0.05)。结论:下调miR-221表达能抑制子宫颈癌细胞的恶性生物学行为,其机制与激活caspase信号通路从而诱导细胞凋亡以及调控MMP-13和TIMP-3的表达有关。
【作者单位】： 济南市第五人民医院妇产科;中国计划生育研究所细胞生物实验室;
【关键词】： 子宫颈癌 miR-抑制剂 细胞凋亡 恶性生物学行为 作用机制
【基金】：山东省医药卫生资助项目(No.2013WS0010)~~
【分类号】：R737.33
【正文快照】： 细胞生物实验室,北京100081)[Chin J Cancer Biother,2016,23(5):640-645.DOI:10.3872/j.issn.1007-385X.2016.05.009]子宫颈癌是造成妇女死亡的主要恶性肿瘤之一,全球每年有近50万新增子宫颈癌病例,85%患者发生在发展中国家[1-2]。目前,我国子宫颈癌患者趋于年轻化[3]。该病

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2 周晨慧;;干扰素-γ对宫颈癌细胞免疫分子表达的影响[J];现代医药卫生;2007年01期

3 潘惠艳;赵群;詹阳;赵丽红;张卫华;吴玉梅;;电压门控钠离子通道表达对宫颈癌细胞增殖侵袭转移作用的研究[J];中国肿瘤临床;2012年04期

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本文编号：691920