子痫前期大鼠微循环改变及选择素对其影响

发布时间：2017-09-01 04:41

  本文关键词：子痫前期大鼠微循环改变及选择素对其影响

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【摘要】：目的:子痫前期(Preeclampsia,PE)是一种妊娠期并发症,其临床特点主要是孕20周出现的高血压和蛋白尿,或合并其他系统的病变,比如血小板减少、肝酶升高、肾功能不全、肺水肿、视觉障碍和脑功能紊乱。子痫前期是导致母婴不良妊娠结局的主要原因,其发病率逐年增长。研究发现子痫前期与母婴将来罹患心血管疾病和代谢性疾病有关。炎症反应、内皮细胞损伤和白细胞及血小板的活化可导致全身的微循环障碍,这是子痫前期的发病特点。选择素介导炎症时白细胞的早期黏附,包括P-选择素(P-selectin)、E-选择素(E-selectin)和L-选择素(L-selectin)。本实验通过腹腔注射NO合酶抑制剂左旋亚硝基精氨酸甲酯(Nitro-L-arginine methylester,L-NAME)的方法建立子痫前期大鼠模型,拟通过观察肠系膜微循环和胎盘超微结构改变,测定选择素在子痫前期孕鼠的表达情况,探讨子痫前期大鼠微循环改变及选择素对子痫前期微循环障碍的影响,为子痫前期的发病提供新的理论依据和诊疗思路。方法:1实验动物购买10周龄的SD大鼠,雌雄各30只。按雌:雄比例为1:1合笼,观察饲养笼内是否有阴道栓脱落,若看到有阴道栓,则规定为孕第1天。2动物模型的建立及分组30只孕鼠中随机选取20只孕鼠用来建立子痫前期孕鼠模型,孕7-11天连续腹腔注射L-NAME,模型成功13只,其中选取10只作为子痫前期组。剩余10只孕鼠作为对照组,孕7-11天连续腹腔注射等量的生理盐水。孕第5、9和17天定时测量两组孕鼠尾动脉收缩压(Systolic blood pressure,SBP)和收集24h尿液。模型成功标准是收缩压升高30mmHg以上。3标本采集和检测指标孕19天,麻醉两组孕鼠,待麻醉成功后,使用WX-9B型微循环显微镜观察肠系膜微循环,待观察完毕后采血和胎盘组织。使用透射电镜(transmissionelectronmicroscopy,tem)观察胎盘的超微结构改变,主要是观察合体滋养细胞的变化。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linkedimmunosorbentassay,elisa)测定血浆中可溶性p-选择素(solublep-selectin,sp-selectin)、可溶性e-选择素(solublee-selectin,se-selectin)和l-选择素(solublel-selectin,sl-selectin)的含量,使用免疫组织化学技术(immunohistochemistry,ihc)观察p-selectin和e-selectin在胎盘的表达情况,使用软件图像分析得出平均光密度值(meanopticaldensity,mod)。4统计方法采用spss13.0统计软件对数据进行统计学分析,数据进行正态性检验和方差齐性分析后,对于符合正态性检验和方差齐的数据则使用两独立样本的t检验,若数据符合正态性检验但方差不齐则使用两独立样本的t'检验或非参数检验,若数据不符合正态性检验则采用两独立样本的非参数检验。取α=0.05作为检验水准,p0.05为差异有统计学意义。结果:1收缩压和24h尿蛋白浓度:子痫前期组与对照组比较,两组大鼠孕5天的收缩压和24h尿蛋白浓度无明显差异(均p0.05);子痫前期组孕鼠孕9天、孕17天的收缩压和24h尿蛋白浓度均高于对照组同日的收缩压和24h尿蛋白浓度,差异有统计学意义(均p0.001)。2孕鼠活体肠系膜微循环1)对照组的肠系膜微血管壁整齐光滑,形态柔和,自然弯曲,血管周围无渗出;子痫前期组的肠系膜微血管壁迂曲,边缘不整齐,血管周围有少量渗出。2)子痫前期组肠系膜微静脉内可见大量白细胞贴壁滚动,滚动速度缓慢,白细胞黏附于血管壁并聚集;对照组肠系膜微静脉内仅有白细胞贴壁快速滚动,无白细胞贴壁黏附和白细胞聚集。3)子痫前期组的毛细血管内可见红细胞聚集,而对照组无红细胞聚集。3电镜:对照组的胎盘合体滋养细胞内含有丰富的内质网和线粒体,细胞质内含有少量脂滴(空泡状变性);与对照组相比,子痫前期组的胎盘合体滋养细胞内的线粒体肿胀,内质网扩张,细胞质内可见大量脂滴。4血浆选择素:孕鼠血浆中的sP-selectin、sE-selectin和sL-selectin的浓度,子痫前期组均高于对照组,差异有统计学意义(均P0.001)。5 IHC:P-selectin和E-selectin在孕鼠胎盘中表达主要位于合体滋养细胞和血管内皮细胞的细胞膜及细胞质。P-selectin和E-selectin在子痫前期组的MOD均高于对照组,差异有统计学意义(均P0.001)。结论:1腹腔注射NO合酶抑制剂L-NAME的方法成功建立子痫前期大鼠模型。2子痫前期大鼠肠系膜微循环的变化,说明母体全身出现微循环障碍。3 sP-selectin、sE-selectin和s L-selectin在子痫前期大鼠血浆中的高表达,与肠系膜微循环改变可能有关,其可能通过参与白细胞活化、内皮细胞功能紊乱、炎症反应和血小板活化,导致子痫前期大鼠的机体微循环障碍。4子痫前期大鼠胎盘滋养细胞超微结构变化说明胎盘微循环障碍。5 P-selectin和E-selectin在子痫前期大鼠胎盘中的高表达,与胎盘滋养细胞超微结构改变可能有关,其可能参与胎盘血管内皮细胞功能紊乱和血小板活化,影响胎盘局部微循环。
【关键词】：子痫前期 微循环 选择素 胎盘 大鼠
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R714.244
【目录】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文缩写11-12
• 前言12-13
• 材料与方法13-20
• 结果20-22
• 附图22-28
• 附表28-29
• 讨论29-38
• 结论38-39
• 参考文献39-47
• 综述 妊娠期高血压疾病微循环障碍的研究进展47-58
• 参考文献53-58
• 致谢58-59
• 个人简历59

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