2型糖尿病易感基因miRNA结合位点多态性与妊娠期糖尿病相关性研究

发布时间：2017-09-02 04:23

  本文关键词：2型糖尿病易感基因miRNA结合位点多态性与妊娠期糖尿病相关性研究

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【摘要】：目的妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus, GDM)是以胰岛素分泌不足和胰岛素抵抗为特征的多基因遗传病,与2型糖尿病(T2DM)具有相似的遗传背景。miRNA作为重要的基因表达调控分子参与一系列生理活动,其结合位点单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism, SNP)与疾病的发生密切相关。但目前有关miRNA结合位点SNP与GDM的相关性研究尚未见报道。本研究旨在探讨T2DM易感基因1niRNA结合位点SNP与GDM及糖代谢指标的相关性,并验证SNP位点与相应miRNA的结合性。方法选择全基因组关联研究(genome-wide association study,GWAS)中与T2DM相关,且已在汉族人群(CHB)中验证的基因为候选基因,用NCBI和1000 Genomes数据库筛选候选基因3'UTR区CHB中MAF5%的SNP位点,PolymiRTS Database、MiRDB、TargetScanHuman 5.2和MicroRNA.org 4个软件预测SNP位点miRNA的结合性,选取2个或2个以上软件预测有同一niRNA结合的SNP位点。应用Taqman探针法对纳入的1739例孕妇(其中GDM患者839例,正常对照900例)进行SNP位点基因分型,Sanger测序法验证分型结果的准确性,利用logistic回归和多元线性回归等统计方法分析SNP位点与GDM和相关糖代谢指标的相关性,并用双荧光素酶报告系统在体外验证SNP位点与相应miRNA的结合性。结果1.49个T2DM候选基因中筛选出符合条件的SNP位点17个:SLC30A8 rs2466293、 KCNB1 rs1051295、KCNQ1 rs8234、CDC123rs12126、VPS26A rs1802295、LPIN1 rs1050800、KCNJ11 rs5210、INSRrs1366600、rs3745550、PAX4 rs712699、NLRP3 rs10802502、MFN2 rs1042842、HNF1B rs2688、GIPR rs73042335、CDKN2B rs1063192、CDKN2B rs3217992和CDKN2A rs3088440,软件预测分别是hsa-miR-181a-2-3p、hsa-miR-216a、hsa-miR-380、hsa-miR-361、hsa-miR-510、 hsa-miR-96、hsa-miR-219a-2-3p、hsa-miR-106、hsa-miR-600、hsa-miR-223、 hsa-miR-548、hsa-miR-183、hsa-miR-299、hsa-miR-135b、hsa-miR-323b、 hsa-miR-138和hsa-miR-328结合位点的SNP。17个SNP位点基因型分型成功率均在95%以上,准确性达100%,在对照组均符合Hardy-Weinberg平衡(p0.05)。2.GDM组孕妇年龄、空腹及OGTT 1h,2h,3h血糖和血胰岛素水平、HOMA-IR和胰岛素曲线下面积AUC均显著高于对照组(p0.05),而HOMA-B显著低于对照组(p0.05)。3.基因型和等位基因分布频率比较：6个SNP位点rs2466293 (SLC30A8)、rs1051295 (KCNB1)、rs1042842 (MFN2)、rs1063192(CDKN2B)、rs1366600(Ⅱ(PAX4)的三种基因型在GDM组和对照组的分布频率差异具有统计学意义,少见等位基因纯合型(分别为CC、CC、AA、CC、CC和AA)增加GDM的发病风险(OR值分别为1.455、1.579、1.398、1.480、2.191和1.366)。rs2466293、 rs1051295、rs1042842和rs1063192位点少见等位基因在GDM组的分布频率高于对照组(P0.05)。4.SNP位点基因型与糖代谢指标相关性：1)rs2466293位点危险等位基因C的个数与OGTT 2h血糖呈正相关(b=0.062),与HOMA-B呈负相关(b=-0.057)；CC基因型空腹胰岛素水平低于TT和TT+CT基因型(P0.05)。2)rs1051295位点危险等位基因C的个数与空腹血糖、OGTT 2h和3h血糖及HOMA-IR呈正相关(b值分别为0.006、0.056、0.058和0.065)；CC+CT基因型空腹及OGTT 2h和3h胰岛素水平以及胰岛素曲线下面积均高于TT基因型(P0.05)。3)rs1042842位点危险等位基因A的个数与OGTT 3h血糖呈正相关(b=0.056,P0.05)。4)rs1063192位点危险等位基因CC纯合型独立影响OGTT 1h,2h和3h血糖(b值分别为0.062、0.048和0.062),CC基因型OGTT 3h胰岛素水平高于TT及CT+TT基因型。5)rs712699位点危险等位基因A的个数与OGTT 2h血糖呈正相关(b=0.051,P0.05)。6)rs1802295位点少见等位基因T的个数与空腹血糖和HOMA-IR呈负相关(b值分别-0.050和-0.056,P0.05)。7)rs1050800位点少见等位基因T的个数与OGTT 2h和3h血糖呈正相关,与HOMA-B呈负相关(b值分别0.047、0.061和-0.059,P0.05)。8)rs2688位点少见等位基因C的个数与HOMA-IR及HOMA-B呈负相关(b值分别-0.070和-0.065),CC基因型空腹胰岛素水平低于AA基因型(P0.05)。9)rs10802502少见等位基因C的个数与OGTT 1h血糖呈负相关(b=-0.058),CC基因型OGTT 2h胰岛素水平低于TT及CT+TT基因型(P0.05)。10) rs73042335少见等位基因A的个数与OGTT 1h血糖呈正相关(b= 0.049,P0.05)。11)rs3217992位点AA基因型OGTT 2h和3h胰岛素水平均低于TT基因型(P0.05)。5.双荧光素酶报告实验结果：miR-223与PAX4基因3'UTR区含有rs712699位点AA纯合型基因序列相结合,抑制荧光素酶基因的表达(P0.05)。结论1.本研究在国内外首次发现T2DM易感基因miRNA结合位点SNPrs2466293、 rs1051295、rs1042842、rs1063192、rs1366600和rs712699的少见等位基因纯合型增加GDM的发病风险。2.rs2466293、rs1051295、rs1042842、rs1063192、rs1366600、s712699、rs1802295、 rs1050800、rs2688、rs10802502、rs73042335和rs3217992位点少见等位基因与多个糖代谢指标相关。3.miR-223与PAX4基因3'UT TR区含rs712699 AA纯合型的基因序列结合,可能抑制PAX4基因的表达。
【关键词】：妊娠期糖尿病 miRNA 单核苷酸多态性
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R714.256
【目录】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-10
• 中英文对照缩略词表10-12
• 前言12-17
• 实验材料17-21
• 实验方法21-38
• 实验结果38-70
• 讨论70-79
• 结论79-80
• 参考文献80-92
• 论文综述92-105
• 参考文献100-105
• 攻读硕士学位期间发表文章目录105-106
• 致谢106-107

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8 熊晓燕,边旭明,高平,许杭,钱美仑,刘善英;妊娠期糖尿病患者远期发生糖尿病的相关因素[J];中华妇产科杂志;1998年12期

9 邓姗,吴尚纯;妊娠期糖尿病的饮食治疗多长时间为宜?[J];实用妇产科杂志;2000年03期

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本文编号：776369