TALENs介导的Nanog基因表达下调对宫颈癌HeLa细胞恶性行为的影响

发布时间：2017-09-04 13:11

  本文关键词：TALENs介导的Nanog基因表达下调对宫颈癌HeLa细胞恶性行为的影响

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【摘要】：目的研究Nanog表达下调对宫颈癌HeLa细胞恶性行为的影响。方法通过基因编辑工具转录激活样效应器核酸酶(TALENs)介导Nanog下调表达,基因测序分析Nanog的突变情况;挑取单个细胞培养以筛选出Nanog明显下调表达的单克隆HeLa细胞;RT-PCR检测mRNA表达水平;Western blot检测蛋白表达水平;HeLa细胞的集落形成能力、侵袭性及耐药性分别通过集落形成实验、Transwell侵袭实验及药物敏感性实验检测。结果 TALENs成功介导Nanog基因突变并导致其下调表达,Nanog突变的单克隆HeLa细胞Nanog mRNA和蛋白表达水平较野生型HeLa细胞均下调表达(P0.05)。Nanog突变单克隆HeLa细胞相对于野生型HeLa细胞表现出明显减弱的侵袭、集落形成及化疗药物抵抗能力(P0.05)。结论 Nanog突变减弱HeLa细胞的恶性行为,下调或沉默Nanog表达有望成为一种新型的治疗宫颈癌策略。
【作者单位】： 武汉大学中南医院基因诊断中心;湖北医药学院附属太和医院胚胎干细胞研究湖北重点实验室;湖北医药学院生化教研室;
【关键词】： TALENs Nanog HeLa细胞 宫颈癌
【分类号】：R737.33
【正文快照】： 宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一。近年来,随着早期筛查方法的改进及治疗方案的更新,宫颈癌的发病率及死亡率有一定程度的下降,但在因癌症死亡的发展中国家女性中,宫颈癌仍是排名第二的死亡原因[1-3]。研究表明持续的人乳头瘤病毒(HPV)感染是宫颈癌发生的起始原因[4]。然而,相，

本文编号：791715