GPR30对人类绒毛滋养细胞的侵袭性影响及其与子痫前期发病关系的机制研究

发布时间：2017-09-14 18:24

  本文关键词：GPR30对人类绒毛滋养细胞的侵袭性影响及其与子痫前期发病关系的机制研究

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【摘要】：目的：探讨GPR30在人类胎盘中的表达,研究其对人类绒毛滋养细胞侵袭性的影响,及其与子痫前期发病的关系。方法：应用免疫组化检测早孕期绒毛、正常产妇胎盘和重度子痫前期患者胎盘组织中GPR30的表达。以常氧和缺氧复氧环境分别模拟正常和子痫妊娠状态,用17-p-雌二醇(17β-E2)、GPR30激动剂G1和阻滞剂G15预处理体外培养绒毛组织和人绒毛外滋养细胞株HTR8/SVneo。显微镜下观察体外绒毛组织滋养细胞生长侵袭范围,Transwell侵袭实验检测HTR8/SVneo细胞侵袭能力。免疫荧光法检测绒毛组织和HTR8/SVneo细胞中GPR30蛋白表达情况。Western blot法检测HTR8/SVneo细胞中GPR30和MMP-9蛋白表达。RT-PCR技术检测细胞中GPR30、MMP9及MMP2mRNA。结果：(1)GPR30在早期绒毛组织和正常末期胎盘滋养细胞上都有表达,且早孕期的表达水平高于正常末期胎盘,但在重度子痫前期胎盘上GPR30蛋白表达明显减少；(2)E2及GPR30激动剂G1可增加滋养细胞的侵袭能力,阻滞剂G15则可下调其侵袭性,H/R严重损害滋养细胞的侵袭能力；(3)E2、G1可诱导滋养细胞GPR30蛋白表达上调,而G15则下调其表达。H/R使GPR30蛋白明显下调。(4)GPR30蛋白水平与侵袭相关蛋白MMP-9表达水平有相关性。(5)各实验组之间在GPR30、MMP9和MMP2的mRNA表达水平上未见明显差异。结论：GPR30参与人类滋养细胞侵袭力的调节,对滋养细胞的侵袭力有正性促进作用。GPR30表达的紊乱可能与子痫前期发病有关。
【关键词】：GPR30 滋养细胞 侵袭性 子痫前期
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R714.245
【目录】：

• 符号说明5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10
• 1 标本、试剂、仪器10-13
• 2 主要实验步骤与方法13-18
• 3 实验结果18-22
• 4 讨论22-24
• 5 结论24-25
• 参考文献25-29
• 附图29-39
• 文献综述：雌激素相关肿瘤中的GPR3039-48
• 参考文献44-48
• 致谢48-49
• 攻读硕士期间发表的论文目录49

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本文编号：851595