小鼠非同步移植子宫内膜HOXA10表达变化研究

发布时间：2017-09-16 02:03

  本文关键词：小鼠非同步移植子宫内膜HOXA10表达变化研究

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【摘要】：背景快速发展的辅助生殖技术克服了许多不孕因素,但是种植失败导致体外受精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠成功率仍然较低,约2/3的妊娠失败被认为与非同步移植有关。虽然还未有确切证据证明人类IVF-ET过程中非同步移植会增加后代畸形率,但动物试验表明非同步移植会对妊娠造成包括种植失败、流产、胚胎发育进程异常甚至畸形等不良影响。因此明确非同步移植对妊娠影响的相关机制对于改善IVF-ET结局具有重要意义。为了探讨非同步移植对子宫内膜容受性的影响机制,需要一些标志物来衡量。同源框基因A10(HOXA10)是子宫内膜容受性标志分子之一。整合素β3(ITGp3)是HOXA10的下游靶基因,胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)是蜕膜化标记分子。因此可以通过检测这三种因子的表达水平来探讨非同步移植改变子宫内膜容受性的机制。目的探讨非同步移植是否通过改变HOXA10等子宫内膜容受性相关标志物的表达而改变了子宫内膜容受性。验证非同步移植诱导的种植窗适应性调节是一种病理性异常改变。方法选择6-8周健康ICR小鼠,通过药物促排卵后自然交配妊娠构建超数排卵妊娠小鼠模型、结扎雄鼠构建不育雄鼠模型、性成熟的雌鼠交配不育雄鼠构建假孕鼠模型。收集超促排卵妊娠小鼠孕2天位于输卵管内的胚胎,将2-细胞胚胎随机平均分成两部分,一份冷冻备存；另一部分继续培养至孕3天胚胎冷冻备存。选择假孕3天小鼠,复苏孕2天、孕3天小鼠胚胎,将复苏不同时期胚胎分别对假孕小鼠行左右输卵管移植,形成同步移植和非同步移植自身对照。于孕5天剖取小鼠子宫内膜组织。通过芝加哥蓝染色来判断胚胎种植情况,HE染色光镜下观察内膜组织病理变化,RT-PCR检测Hoxa10, Itgβ3, Igfbp-1 mRNA表达情况,Westernblot技术检测相关蛋白表达情况。结果(1)非同步移植侧内膜着床位点数少于同步移植侧内膜,非同步移植显著降低小鼠胚胎种植率(P=0.002)；(2)光镜下观察非同步移植与同步移植相比,可见内膜分泌反应整体不良,发育较滞后；(3)非同步移植子宫内膜容受性相关基因Hoxa10(P0.05),Itgβ3(P0.05),Igfbp-1(P0.01)mRNA表达较同步移植降低；(4)非同步移植子宫内膜容受性相关基因HOXA10(P0.05),ITGβ3(P0.05) IGFBP-1(P0.05)蛋白表达较同步移植降低。结论 以上结果提示非同步移植可能通过降低Hoxa10, Itgβ3, Igfbp1表达,降低子宫内膜容受性,并引起胚胎种植率下降。
【关键词】：HOXA10 非同步移植 子宫内膜容受性
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R714.8
【目录】：

• 英文缩略词表5-7
• 中文摘要7-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-12
• 材料和方法12-21
• 结果21-28
• 讨论28-34
• 结论34
• 参考文献34-40
• 附录40-41
• 致谢41
• 综述41-51
• 参考文献46-51

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本文编号：860211