胸腺注射供者可溶性抗原在玻璃化冻存人卵巢组织异种移植兔模型中的应用探索

发布时间：2017-09-19 08:49

  本文关键词：胸腺注射供者可溶性抗原在玻璃化冻存人卵巢组织异种移植兔模型中的应用探索

  更多相关文章： 卵巢组织 玻璃化冻存 异种移植 胸腺注射 可溶性抗原 家兔

【摘要】：背景：近几年,罹患肿瘤的女性患者数量不断提高,且发病年龄有年轻化的趋势。不断进步的治疗手段也使得越来越多的年轻肿瘤女性要求保存生育功能。目前,冻存人卵巢组织异种移植已经成为保存癌症女性生育功能的研究热点。大多数研究中,是以裸鼠作为卵巢组织异种移植的受体,获得一定的成果,但是裸鼠与人类的亲缘关系较远,移植物生长空间有限,且饲养成本高。使用家兔作为移植受体可以丰富现有移植模型,为有需要的女性提供更多选择余地。以家兔作为受体,想要长期保存卵巢组织,免疫排异反应是需要克服的问题。20世纪80年代以来,国内外众多学者对胸腺内接种异种抗原诱导移植免疫耐受进行了大量的系统研究,该方法首先通过药物或照射清除受体内成熟T细胞,再通过胸腺内注射异种抗原,使得胸腺新形成的T淋巴细胞经过阴性选择,对异种抗原产生免疫耐受,因而达到抗免疫排异反应的作用。该方法在啮齿类动物上获得较为成熟的应用。但关于家兔胸腺注射是否可诱导免疫耐受尚无相关研究报道。目的：探索胸腺注射供者可溶性抗原在玻璃化冻存人卵巢组织异种移植兔模型中对免疫排异反应的调控作用。方法：将新鲜的卵巢组织通过玻璃化冻存的方法进行低温保存至少4周,复苏后于3小时内进行移植。选择10只4-6周雌性新西兰大白兔作为人卵巢组织异种移植的受体,随机分为实验组(n=5)与对照组(n=5),经去势手术处理后1周,高能X线全身照射(3Gy)。于照射1周后进行胸腺注射供者抗原,处理组每侧胸腺注射0.1ml供者可溶性抗原。对照组注射0.1ml生理盐水。注射1周后进行玻璃化冻存-复苏后的人卵巢组织兔背肌内移植。于照射前,照射后1周(胸腺注射前),注射后1周(移植前),移植后1周、3周、5周、7周留取家兔外周血血清检测家兔雌二醇及IFN-γ和IL-10水平,取新鲜抗凝全血检测兔外周血中CD4及CD8淋巴细胞的比例；所有移植物于移植后8周全部回收。8周后记录卵巢组织回收率及观察肉眼形态；回收后移植物HE染色观察组织形态及纤维化坏死率。结果：1、使用卵巢组织玻璃化冻存的方法能较好的保存卵巢组织；2、照射以后,实验组和对照组IL-10水平显著升高,实验组于移植后3周降至照射前水平,对照组于移植前即将至照射前水平。实验组和对照组相比IFN-γ无显著性差异；实验组CD4+/CD8+比例与移植后3周开始上升,对照组则于移植后1周开始上升。3、移植后8周回收卵巢组织,实验组卵巢组织回收率高于对照组,两组卵巢组织中均可见大量炎症细胞浸润。实验组雌激素水平于移植后1周和移植后3周与移植前相比明显升高,对照组于移植后1周高于移植前,移植后3周与移植前相比无显著性差异。结论：胸腺注射供者可溶性抗原在玻璃化冻存人卵巢组织异种移植兔模型中应用,可能延缓免疫排异反应发生的时间。但本实验未能获得长期免疫耐受。
【关键词】：卵巢组织 玻璃化冻存 异种移植 胸腺注射 可溶性抗原 家兔
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R-332;R714
【目录】：

• 致谢4-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 中英文缩略词12-14
• 1 引言14-18
• 2 实验材料与方法18-29
• 3 实验结果29-39
• 4 讨论39-44
• 5 结论44-45
• 参考文献45-49
• 综述一49-62
• S每嘉南，
  
  本文编号：880678
  suoshi