NHEJ信号通路关键基因与宫颈鳞癌同步放化疗敏感性的关系

发布时间：2017-09-26 17:03

  本文关键词：NHEJ信号通路关键基因与宫颈鳞癌同步放化疗敏感性的关系

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【摘要】：宫颈鳞癌是宫颈癌的一种主要类型,严重威胁着女性的身体健康。目前,放疗与以顺铂为基础的化学药物相结合的治疗方式,已成为临床上治疗中晚期宫颈癌的标准方法,通常称之为同步放化疗(concurrent chemoradiotherapy, CCRT)。相对于传统的单独放疗及其他治疗手段,接受CCRT的患者群体拥有更长的生存期和更为轻微的毒副作用。然而,仍有一部分患者无法从中受益。发现预测宫颈鳞癌放化疗敏感性的分子标志物对临床治疗具有重要意义。CCRT直接或间接作用于DNA或DNA代谢过程,诱发DNA双链断裂(DNA double strand break, DSB),以达到杀死肿瘤细胞的效果。而细胞主要通过NHEJ信号通路来修复DSB,因此肿瘤细胞NHEJ修复能力与放疗或化疗敏感性密切相关。大量研究表明,NHEJ信号通路中XRCC4、XRCC5、XRCC6、LIG4、PRKDC及DCLRE1CmRNA表达及单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphisms, SNP)影响细胞对放／化疗的敏感性。本文以42例宫颈鳞癌活检样本为研究对象,首先利用real time-PCR技术分析NHEJ信号通路6个关键基因(XRCC4、XRCC5、XRCC6、LIG4、PRKDC及DCLREIC) mRNA表达水平,然后将检测结果与患者对CCRT敏感性进行关联分析。结果表明,XRCC6 mRNA高表达患者应答率为47.6%,低表达患者应答率为90.5%(P=0.003)；其他5个关键基因的mRNA表达水平与患者的应答率无显著性关联。此外,我们进一步分析了XRCC6基因rs2267437多态性与CCRT敏感性的关系。结果显示,该多态性与患者的应答率无关。XRCC6mRNA表达水平可作为预测宫颈鳞癌患者CCRT疗效的分子标志物。
【关键词】：宫颈鳞癌 同步放化疗 NHEJ信号通路 实时荧光定量PCR
【学位授予单位】：西北大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.33
【目录】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-6
• 英文~.略语表6-10
• 前言10-11
• 第一章 绪论11-22
• 1.1 宫颈癌及其治疗现状11-12
• 1.1.1 宫颈癌11
• 1.1.2 宫颈癌治疗现状11-12
• 1.2 NHEJ信号通路及同步放化疗12-17
• 1.2.1 DNA损伤12-14
• 1.2.2 HEJ信号通路14-15
• 1.2.3 NHEJ信号通路关键基因mRNA表达与放疗或化疗的关系15-16
• 1.2.4 NHEJ信号通路关键基因多态性与放疗或化疗的关系16-17
• 1.3 常见基因mRNA表达及SNP的检测方法17-20
• 1.3.1 常见的基因mRNA表达检测方法17-19
• 1.3.2 常见SNP的检测方法19-20
• 1.4 立题背景及意义20-22
• 第二章 宫颈鳞癌样本临床信息22-24
• 2.1 病例基础信息22
• 2.2 病例入选标准22
• 2.3 治疗标准22
• 2.4 临床疗效评价标准22-23
• 2.5 小结23-24
• 第三章 Real Time-PCR技术检测NHEJ信号通路关键基因mRNA表达反应体系的建立及样本检测24-37
• 3.1 实验原理24-25
• 3.2 实验材料与仪器25-26
• 3.2.1 材料25
• 3.2.2 试剂25
• 3.2.3 仪器25
• 3.2.4 溶液配制25-26
• 3.3 实验过程26-31
• 3.3.1 引物与探针的设计26-28
• 3.3.2 RNA提取28-29
• 3.3.3 Real time-PCR最终实验体系及条件29-31
• 3.3.4 检测引物及探针的扩增效率31
• 3.3.5 检测SCC样本中NHEJ信号通路关键基因mRNA表达31
• 3.4 实验结果31-35
• 3.4.1 SCC样本RNA检测结果31-32
• 3.4.2 引物及探针的扩增效率32-34
• 3.4.3 SCC样本中NHEJ信号通路关键基因mRNA表达结果34-35
• 3.5 小结35-37
• 第四章 焦磷酸测序技术检测XRCC6 rs2267437多态性反应体系的建立及样本检测37-45
• 4.1 实验原理37-38
• 4.2 实验材料与仪器38-39
• 4.2.1 材料38
• 4.2.2 试剂38
• 4.2.3 仪器38-39
• 4.2.4 溶液配制39
• 4.3 实验过程39-42
• 4.3.1 引物的设计39
• 4.3.2 样本DNA提取39-40
• 4.3.3 焦磷酸测序最终实验体系及条件40-41
• 4.3.4 SCC样本中rs2267437多态性检测41-42
• 4.4 实验结果与分析42-44
• 4.4.1 PCR扩增产物电泳图42
• 4.4.2 焦磷酸测序结果42-43
• 4.4.3 SCC样本中rs2267437多态性检测结果43-44
• 4.5 小结44-45
• 第五章 宫颈鳞癌同步放化疗敏感性预测分子的鉴定45-50
• 5.1 NHEJ信号通路关键基因mRNA表达与SCC患者CCRT敏感性的关系45-48
• 5.1.1 NHEJ信号通路关键基因mRNA表达与患者临床信息之间的关系45-46
• 5.1.2 DNA-PK复合物中基因mRNA表达相关性分析46
• 5.1.3 NHEJ信号通路关键基因mRNA表达与SCC患者CCRT敏感性的关系.46-47
• 5.1.4 SCC患者CCRT敏感性多因素Logistic回归分析47-48
• 5.2 Rs2267437与SCC患者CCRT敏感性的关系48
• 5.2.1 Rs2267437多态性与患者临床信息之间的关系48
• 5.2.2 Rs2267437多态性与SCC患者CCRT敏感性的关系48
• 5.3 XRCC6基因mRNA表达水平与rs2267437多态性的关系48-49
• 5.4 小结49-50
• 全文小结50-51
• 参考文献51-59
• 攻读硕士学位期间参加的主要科研项目59-60
• 致谢60

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 陈旭;齐凤坤;康立功;李景富;;实时荧光定量PCR技术研究进展及其应用[J];东北农业大学学报;2010年08期

2 唐永凯;贾永义;;荧光定量PCR数据处理方法的探讨[J];生物技术;2008年03期

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本文编号：924667