TLR4乙酰化在GDM发病机制中的作用研究

发布时间：2017-09-30 06:25

  本文关键词：TLR4乙酰化在GDM发病机制中的作用研究

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【摘要】：背景:妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)是妊娠期常见的并发症,给孕妇和胎儿的健康带来了极大的危害,包括感染、羊水过多、巨大胎儿、胎儿生长受限、胎儿畸形率增加等。目前认为,胰岛素抵抗(insulin resistant,IR)、胰岛功能受损所致的胰岛素相对分泌不足是GDM发生的主要病因,孕妇体内慢性低度炎症状态参与了胰岛功能损伤和IR的形成。近年来,炎症在GDM发病中的作用已成为研究的热点。2006年,我们课题组通过对MBL基因突变的检测,完成了对GDM炎症发病机制的初步研究,研究发现MBL基因第54位密码子的点突变可降低血清MBL的浓度,低浓度的MBL可能参与了GDM的发病,接着我们又从TLR4 m RNA、NF-κB m RNA及炎症因子的表达及其相关性研究发现,LPS-TLR4-NF-κB通路激活导致炎症因子的释放促使了GDM的发病。目的:在前期研究的基础上,本研究将观察TLR4乙酰化在正常孕妇、GDM孕妇外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)内的表达情况,从LPS-TLR4-NF-κB通路的起始点进一步探究GDM的炎症发病机制。方法:抽取正常孕妇、GDM孕妇晨起静脉血15ml,最终各取30例,Ficoll淋巴细胞分离液经密度梯度离心法分离PBMC并保留血清,血清用于检测内毒素的含量,PBMC培养48h后加入终浓度为1ug/ml的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)干预培养,建立“炎症模型”;干预培养24h后收获细胞并分离上清。TLR4乙酰化的表达采用免疫沉淀法和Western blot法检测;NF-κB p65的表达采用Western blot法检测;上清液中炎症因子TNF-α、IL-1、IL-10的水平采用ELISA法检测。结果:1.GDM孕妇血清LPS(0.92±0.03)IU/ml水平高于正常孕妇(0.53±0.02)IU/ml,差异具有统计学意义(P0.05)。2.GDM孕妇体内外周血单核细胞发生TLR4乙酰化变化,而正常孕妇体内则未检测到TLR4乙酰化的发生。3.LPS干预培养,建立“炎症模型”后,正常+LPS组、GDM+LPS组TLR4乙酰化、NF-κB p65的表达增加,且GDM+LPS组明显高于GDM组和正常+LPS组。各组TLR4乙酰化与NF-κB蛋白表达量之间具有正相关性(r GDM组=0.901,r正常+LPS组=0.870,r GDM+LPS组=0.942)。4.正常组、GDM组、正常+LPS组、GDM+LPS组炎症因子的表达水平差异有统计学意义,TNF-α的表达:45.49±0.81、55.97±2.84、52.48±1.39及62.55±0.87;IL-1的表达:53.82±5.13、75.92±1.18、73.60±0.99及89.08±2.93;IL-10的表达:21.01±0.51、31.42±1.52、28.77±0.63及39.51±3.81。结论:TLR4的配体LPS调控其乙酰化修饰的程度,并通过TLR4乙酰化修饰影响LPS-TLR4-NF-κB通路的活化,促进通路下游炎症因子的释放,从而参与GDM的发生发展。
【关键词】：妊娠期糖尿病 炎症 TLR4 乙酰化 NF-κB
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R714.256
【目录】：

• 英文缩略词对照表(Abbreviation)5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 1、前言12-16
• 2、材料与方法16-26
• 3、结果26-29
• 4、讨论29-34
• 5、结论34
• 6、参考文献34-40
• 附录一 个人简历40-41
• 致谢41-42
• 综述42-50
• 参考文献46-50

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

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本文编号：946655