妊娠期糖尿病胎盘PPARγ水平及其对新生儿体脂的影响

发布时间：2017-10-04 17:41

  本文关键词：妊娠期糖尿病胎盘PPARγ水平及其对新生儿体脂的影响

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【摘要】：目的:本研究旨在探讨妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)胎盘PPARγ水平以及其对新生儿体脂的影响。方法:采用前瞻性队列研究的方法,选取2014年5月-2015年5月在铜陵市妇幼保健院产前门诊做常规产检,并在此分娩的孕早期单胎孕妇,排除患有肝肾疾病、代谢性疾病、遗传性疾病等患者以及孕前糖尿病患者。于孕24-28周,对所有研究对象进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)试验,并根据OGTT结果分为两组,即正常组与GDM组。随访研究对象至胎儿出生,收集胎盘及脐血样本;并于胎儿出生24小时内,进行体格指标测量。后期进行胎盘PPARγ的表达水平检测,即实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹实验。结果:(1)按照纳入和排除标准,本次研究共收集孕早期研究对象783人,由于失访、流产、死产、后期拒绝合作等原因,研究对象中失访151人,最终观察到632人。根据孕24-28周OGTT结果,观察队列中GDM组189例,正常组孕妇443例。至研究队列随访结束,最终收集到研究对象的孕中期血样612例,孕晚期血样444例,胎盘272例,脐血样本266例。(2)GDM组新生儿出生体重3.40±0.50kg,正常组新生儿出生体重为3.36±0.45 kg,两组新生儿出生体重之间的差异无统计学意义(P=0.305)。但GDM组新生儿体脂百分含量为(18.37±5.92)%,正常组新生儿体脂百分含量为(15.45±4.89)%,差异具有统计学意义(P0.001)。(3)RT-PCR结果显示两组之间PPARγm RNA表达水平的差异有统计学意义,GDM组呈下调趋势(P0.05)。两组之间的CD36、FABPpm、FATP-1、FATP-2、FATP-3和FATP-4m RNA表达水平的差异均具有统计学意义(P0.05),GDM组均呈下调趋势(P0.05);FATP-5和FATP-6 m RNA表达水平在两组之间的差异无统计学学意义。(4)Western blot结果显示正常组与GDM组PPARγ胎盘蛋白表达水平的差异具有统计学意义(P=0.013),GDM组胎盘PPARγ蛋白呈下调趋势,表达水平降低。其对胎盘脂肪酸相关蛋白的表达水平产生影响:FATP-1(P=0.008)、FATP-3(P=0.006)蛋白的表达水平在两组之间的差异具有统计学意义,GDM组低于正常组。而FATP-2(P=0.006)蛋白的表达呈上调趋势,其他胎盘脂肪酸相关蛋白CD36、FABPpm、FATP-4、FATP-5及FATP-6蛋白的表达水平尚未观察到变化,差异均无统计学意义(P(29)0.05)。(5)相关分析表明胎盘PPARγ蛋白含量与新生儿体脂含量之间呈负相关关系,r=-0.693,P(27)0.001。结论:PPARγ表达水平降低影响了某些脂肪酸调控基因的表达水平,从而影响脂肪酸结合蛋白、脂肪酸转运蛋白的正常表达,引起GDM孕妇体内脂肪酸代谢紊乱,导致胎儿宫内脂肪增多及脂肪生成比例失调,体脂含量较正常孕妇分娩的子代高。
【关键词】：妊娠期糖尿病 PPARγ 脂肪酸转运蛋白 胎盘 体脂
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R714.256
【目录】：

• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 1 前言11-13
• 2 资料与方法13-25
• 2.1 研究对象13-14
• 2.2 方法14-17
• 2.2.1 GDM诊断标准14
• 2.2.2 体格测量14-15
• 2.2.3 新生儿体脂百分含量的估计15-16
• 2.2.4 血样、胎盘采集16-17
• 2.3 实时逆转录-聚合酶链反应17-20
• 2.3.1 RNA提取准备工作17
• 2.3.2 RNA提取步骤17-18
• 2.3.3 逆转录18
• 2.3.4 实时定量PCR18-20
• 2.4 蛋白提取20-21
• 2.4.1 组织裂解20
• 2.4.2 蛋白定量20
• 2.4.3 分装、保存样品20-21
• 2.5 蛋白质印迹试验21-24
• 2.5.1 SDS-PAGE电泳21-22
• 2.5.2 转膜22-23
• 2.5.3 免疫反应23
• 2.5.4 化学发光与显影23-24
• 2.6 糖化血红蛋白检测24
• 2.7 血糖检测24
• 2.8 统计学分析24-25
• 2.9 技术路线图25
• 3 结果25-35
• 3.1 研究对象人口学基本特征25-27
• 3.2 研究对象孕期生化指标比较27
• 3.3 新生儿体格测量指标27-28
• 3.4 新生儿体脂百分含量的比较28
• 3.5 GDM对新生儿体脂百分含量影响的多元线性回归分析28-29
• 3.6 胎盘脂肪酸转运子m RNA的表达水平29-32
• 3.7 胎盘脂肪酸转运蛋白的检测结果32-34
• 3.8 PPARγ m RNA与胎盘脂肪酸转运子m RNA之间的相关分析34
• 3.9 PPARγ 蛋白与胎盘脂肪酸转运蛋白含量之间的相关分析34-35
• 3.10 胎盘PPARγ 蛋白含量与新生儿体脂含量之间的相关分析35
• 4 讨论35-40
• 4.1 新生儿体脂百分含量的监测与评价35-36
• 4.2 脂肪酸在母体-胎儿之间的转运36-37
• 4.3 GDM胎盘内环境对脂肪酸转运水平的影响37-38
• 4.4 PPARγ 与胎盘脂代谢之间的关系38-39
• 4.5 GDM胎盘PPARγ 水平变化对新生儿体脂的影响39-40
• 5 结论40-41
• 参考文献41-43
• 附录43-44
• 致谢44-45
• 综述45-55
• 参考文献54-55

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