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HPV及高危亚型与卵巢上皮癌发病的相关性研究

发布时间:2017-10-05 08:10

  本文关键词:HPV及高危亚型与卵巢上皮癌发病的相关性研究


  更多相关文章: 甲醛固定石蜡包埋组织 DNA PCR 高危亚型 HPV感染


【摘要】:目的:探讨HPV感染以及其高危亚型HPV16和HPV35与卵巢上皮癌发病情况之间的关联性,寻找卵巢上皮癌发病的相关因素,为卵巢上皮癌的预防提供客观依据。方法:运用PCR技术扩增从甲醛固定石蜡包埋组织中提取的DNA:(1)提取石蜡包埋的卵巢组织DNA:625例石蜡组织标本分为正常卵巢组、良性肿瘤组和癌变卵巢三组:经二甲苯脱蜡,使用DNA提取试剂提取出组织DNA。(2)运用PCR技术检测HPV的感染率:①将提取的DNA作为模板,用扩增目的片段(450bp)的引物PGMY09/11进行初步扩增;②选取第一步中PGMY扩增结果为阴性的产物作为模板,用扩增的目片段较短(150bp)的引物GP5+/6+进行第二次扩增。(3)亚型选择:将PGMY和GP5+/6+扩增结果为阳性的标本,再应用PCR技术从中筛选出高危型HPV16和HPV35,观察高危亚型16和35各占比值。结果:(1)从石蜡包埋组织中提取出DNA。(2)成功建立了HPV的巢式PCR和降落PCR扩增体系。(3)在癌变卵巢组织中HPV的阳性检出率显著高于正常对照组和良性肿瘤组,同时良性肿瘤组的阳性检出率也高于正常对照组,44.32%的标本(95%CI=40.48-48.22%)使用PGMY09/11和GP5+/6+两对引物的巢式PCR扩增结果呈阳性,癌变组中63.35%(95%CI=58.95-68.65%)的样本PCR扩增结果呈阳性,正常组织和卵巢良性肿瘤组织中扩增结果阳性分别占有17.64%(95%CI=12.43-22.87%)和37.37%(95%CI=29.38-45.42%),各组的阳性率差异有统计意义(P0.005P0.005)。(4)对HPV阳性组织中的HPV16和HPV35两种高危亚型进行检测,癌变组HPV16占较大比值,共有53.97%(95%CI=45.78-61.8%)为HPV16,与正常对照组比较差异有统计学意义(P0.005)。HPV阳性标本中仅3.97%(95%CI=1.68-6.26%)为HPV35,癌变组与正常组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:我们认为卵巢上皮癌的发生发展可能与HPV感染相关。高危亚型HPV16可能对卵巢组织具有较强的致癌作用,HPV35也可能在卵巢癌的形成中起到一定作用。
【关键词】:甲醛固定石蜡包埋组织 DNA PCR 高危亚型 HPV感染
【学位授予单位】:湖南师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R737.31
【目录】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-11
  • 前言11-14
  • 第一章 高危型HPV与卵巢上皮癌发病的关联14-30
  • 1.1 材料与方法14-21
  • 1.1.1 标本来源14
  • 1.1.2 主要试剂14-15
  • 1.1.3 主要仪器设备15-16
  • 1.1.4 主要耗材16
  • 1.1.5 主要方法16-18
  • 1.1.6 PCR18-20
  • 1.1.7 统计学分析20-21
  • 1.2 结果21-23
  • 1.2.1 HPV PCR产物琼脂糖凝胶电泳结果21-22
  • 1.2.2 HPV PCR产物测序结果比对分析22
  • 1.2.3 HPV PCR结果统计与分析22-23
  • 1.3 讨论23-30
  • 第二章 HPV16、HPV35感染与卵巢上皮癌发病的关联30-39
  • 2.1 材料与方法30-33
  • 2.1.1 标本来源30
  • 2.1.2 主要试剂30-31
  • 2.1.3 主要仪器设备31
  • 2.1.4 主要耗材31
  • 2.1.5 主要方法31-33
  • 2.1.6 统计分析33
  • 2.2 结果33-36
  • 2.2.1 HPV亚型PCR产物琼脂糖凝胶电泳结果33-34
  • 2.2.2 HPV亚型PCR产物测序结果比对分析34-36
  • 2.2.3 HPV16和HPV35 PCR结果统计与分析36
  • 2.3 讨论36-39
  • 结论39-40
  • 参考文献40-47
  • 综述47-58
  • 参考文献53-58
  • 攻读学位期间主要研究成果58-59
  • 中英文缩略词对照表59-60
  • 致谢60

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本文编号:975683

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