骨髓间充质干细胞减轻染矽尘小鼠肺泡炎机制研究

发布时间：2017-08-30 18:04

  本文关键词：骨髓间充质干细胞减轻染矽尘小鼠肺泡炎机制研究

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【摘要】：目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)减轻染矽尘小鼠肺泡炎的机制。方法取无特定病原体级健康雄性C57BL/6小鼠5只,以全骨髓贴壁法分离培养BMSCs,通过三系分化诱导实验鉴定其多向分化能力。取45只同类小鼠随机分为对照组、二氧化硅(SiO_2)组和BMSCs移植组。经气管软骨间隙,对照组小鼠予一次性注射0.90%氯化钠溶液20.0μL;SiO_2组和BMSCs移植组小鼠先予一次性注射质量浓度为250 g/L的SiO_2混悬液20.0μL,6 h后经鼠尾静脉分别一次性输注500.0μL的0.90%氯化钠溶液或BMSCs(细胞密度为1×109/L)。造模后第3天处死小鼠,检测肺系数并观察肺部组织病理学改变情况,采用酶联免疫吸附实验检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞因子表达情况,瑞氏-吉姆萨染色BALF中细胞并计数,流式细胞仪(FCM)检测小鼠BALF中巨噬细胞百分比。结果 BMSCs经成骨、成脂、成软骨诱导分化后成功培育出骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞。染尘后第3天,SiO_2组小鼠出现肺泡炎的组织病理学改变;BMSCs移植组小鼠的肺组织结构正常,无明显炎性改变。SiO_2组小鼠肺系数高于对照组(P0.05),BMSCs移植组小鼠肺系数低于SiO_2组(P0.05),且与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。SiO_2组小鼠BALF中白细胞介素(IL)-1β、IL-6和趋化因子配体3表达水平均较对照组上调(P0.05),BMSCs移植组小鼠上述3个指标均较SiO_2组下调(P0.05),恢复至对照组的水平(P0.05)。SiO_2组和BMSCs移植组小鼠BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平均高于对照组(P0.05),BMSCs移植组小鼠TNF-α表达水平与SiO_2组比较,差异无统计学意义(P0.05)。3组小鼠BALF中IL-10表达水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。瑞氏-吉姆萨染色细胞结果显示:SiO_2组小鼠BALF中总细胞和巨噬细胞数目均高于对照组(P0.05),BMSCs移植组小鼠上述2个指标均低于SiO_2组(P0.05),与对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。FCM检测BALF中巨噬细胞百分比的结果与瑞氏-吉姆萨染色细胞结果相一致。结论 BMSCs可通过抑制肺泡巨噬细胞数量和活性,下调BALF中IL-1β和IL-6,减轻染矽尘小鼠的肺泡炎。
【作者单位】： 山西医科大学公共卫生学院;广东省职业病防治院广东省职业病防治重点实验室;南方医科大学基础医学院免疫学教研室;成都军区昆明总医院干细胞与免疫细胞生物技术国家地方联合工程实验室;
【关键词】： 骨髓间充质干细胞 二氧化硅 肺 炎症 巨噬细胞 小鼠
【基金】：国家科技支撑计划项目(2014BAI12B01) 国家临床重点专科建设项目(2011-09) 广东省职业病防治重点实验室(2012A061400007) 广东省科技计划项目(2014A020212551,2016A020215131) 广东省医学科研基金(A2015624,A2016155) 云南省卫生科技计划项目(2014NS132)
【分类号】：R135.2
【正文快照】： 矽肺是我国常见的职业病之一,其发病机制尚未完全阐明。矽肺的病程分为肺泡炎期和纤维化期[1]。初始的肺泡炎期,吸入的二氧化硅(Silicon dioxide,Si O2)粉尘被肺巨噬细胞吞噬,激活巨噬细胞并使之释放大量细胞因子,募集炎性细胞的聚集;同时由于Si O2的毒作用导致巨噬细胞坏死并

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本文编号：760776