MAGE-3基因疫苗的构建及其免疫活性的实验研究

发布时间：2017-10-13 20:26

  本文关键词：MAGE-3基因疫苗的构建及其免疫活性的实验研究

  更多相关文章： 黑色素瘤抗原- 基因疫苗 免疫应答

【摘要】：目的:构建肿瘤抗原MAGE-3基因疫苗,观察其诱导免疫应答的能力。方法:构建带有目的基因MAGE-3基因和报告基因FGFP的重组表达质粒pEGFP-MAGE3,酶切鉴定后经脂质体法转染LA795后,用G418筛选阳性克隆。在荧光显微镜下观察FGFP的表达,用RT-PCR法检测LA795中MAGE-3 mRNA表达。将重组质粒pEGFP-MAGE3肌肉注射接种C57BL/6J小鼠,间隔10天,共3次,末次免疫7天后利用乳酸脱氢酶法检测脾淋巴细胞CIL杀伤活性、ELISA法脾细胞培养上清IL-2、IFN-γ浓度。结果:成功地构建了重组pEGFP-MAGE3质粒。转染LA795后,经荧光显微镜及RT-PCR分别检测到MAGE-3和EGFP的表达。杀伤实验结果显示,免疫组小鼠脾细胞对B16的杀伤率明显高于对照组(P0.05)。脾细胞培养上清中Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2水平明显升高。结论:成功地构建了MAGE-3基因疫苗,该疫苗能够有效地诱导特异性免疫应答,为进一步应用该基因进行免疫治疗提供了实验依据。
【作者单位】： 白城医学高等专科学校;吉林大学第二医院;
【关键词】： 黑色素瘤抗原- 基因疫苗 免疫应答
【分类号】：R392.1
【正文快照】： 肺癌是目前世界上发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,每年新发病例160万,死亡140万,分别占全部恶性肿瘤的13%和18%[1]。目前肺癌的治疗手段以手术、化疗、放疗为主,但其治疗效果并不能令人满意。随着肿瘤免疫学理论的飞速发展,以适宜的肿瘤特异性抗原为靶点,对肿瘤患者进行免疫治

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 张丽英,李青,陈广生,林圣彩,叶菁,司少艳,张丰;真核表达载体pIRES2-EGFP-Axin的构建及其在神经胶质瘤细胞内的表达[J];细胞与分子免疫学杂志;2005年04期

2 袁芳;刘映红;田俊玮;陈俊香;刘伏友;;pIRES2-EGFP-gAd质粒载体构建及在大鼠肾脏的表达[J];中国组织工程研究与临床康复;2010年33期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 胡沛臻;温江田;路凡;王孝功;李侠;司少艳;葛伟;黄杨;张秀敏;隋延仿;;溶氧反馈-补料分批技术高密度培养基因重组MAGE1/HSP70/MAGE3工程菌[J];第三军医大学学报;2007年16期

2 胡沛臻;路凡;王孝功;李侠;司少艳;黄杨;马斌;张秀敏;隋延仿;;重组人黑色素瘤抗原MAGE3/HSP70融合蛋白工程菌的高密度发酵及其免疫学活性[J];第四军医大学学报;2007年03期

3 葛伟;李源;张珊红;张秀敏;黄杨;胡沛臻;孙玉静;隋延仿;;纳米疫苗经不同途径给药后的抗肿瘤免疫学效应比较[J];解放军医学杂志;2008年02期

4 张利军;张惠忠;陈广生;叶菁;师建国;;携带人MAGE-1基因重组腺病毒的构建及其在肝癌细胞中的表达[J];免疫学杂志;2008年03期

5 徐凛峰;朱进;焦永军;张建平;;肝细胞癌患者组织中MAGE-1基因的原核表达及鉴定[J];南京医科大学学报(自然科学版);2006年07期

6 胡玲;王洪琦;成晓燕;崔娜娟;胡晨霞;李建国;叶丽萍;;白花蛇舌草对H22肝癌细胞热休克蛋白70表达的影响[J];广州中医药大学学报;2007年01期

7 王有为;宋玉光;胡火珍;林洪;邢玉芝;陈芬;;增强型绿色荧光蛋白表达对鼠C6细胞生物学特征影响的研究[J];四川大学学报(自然科学版);2006年03期

8 张爱莲;吴道澄;刘菲;张富春;;质粒纳米乳剂的制备与阴离子交换色谱测定方法[J];生物工程学报;2007年06期

9 张秀敏;史琪琪;林慧;王军伟;李增山;;抗肿瘤疫苗MAGE1-MAGE3-HSP70蛋白特性及其纯化策略的研究[J];现代生物医学进展;2011年23期

10 胡沛臻;隋延仿;李侠;张建芳;司少艳;张秀敏;;表达MAGE-1/HSP70/MAGE-3工程菌的稳定性[J];中国生物制品学杂志;2006年06期

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 黄亚渝;MAGE-n与CD80融合基因肿瘤疫苗的构建及体内抑瘤效应的研究[D];第四军医大学;2005年

2 孙玉静;肿瘤基因工程纳米疫苗的研制及抗肿瘤效应的研究[D];第四军医大学;2005年

3 吴永魁;仔猪冷应激反应中激素、HSP70及其mRNA的动态分析[D];吉林大学;2006年

4 葛伟;肿瘤基因工程纳米乳剂疫苗的药效学研究[D];第四军医大学;2006年

5 司少艳;肝癌靶向调控SEA-CD80基因共表达腺病毒载体的构建及抗癌免疫效应的研究[D];第四军医大学;2006年

6 章宏海;热激蛋白HSP70融合蛋白疫苗的抗肿瘤作用研究以及HSP70在免疫调控中的作用[D];复旦大学;2006年

7 李敏;凋亡相关基因在放线菌素D诱导胃癌细胞凋亡中的作用及其在胃癌组织中的表达和临床意义[D];兰州大学;2007年

8 殷波;人类泌尿系统肿瘤组织中肿瘤—睾丸抗原基因及蛋白的表达情况[D];中国医科大学;2007年

9 胡沛臻;恶性肿瘤基因工程纳米疫苗的研制及其药代动力学初步研究[D];第四军医大学;2007年

10 黄杨;超抗原SEA诱导T细胞增殖和无能的体内外研究[D];第四军医大学;2007年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 穆东;逐级急性肝损伤大鼠血清TNF-α、IL-6和肝组织HSP70表达变化及其意义[D];泸州医学院;2011年

2 陈芹芹;纳米乳剂与天冬等5种中草药提取物对流感灭活疫苗的佐剂效应研究[D];北京协和医学院;2011年

3 王有为;Human Neurotrophin-3绿色荧光表达载体的构建及真核表达[D];四川大学;2006年

4 唐鹿群;hTERT与HSP70融合蛋白的构建及其对DC分化成熟作用的研究[D];南京医科大学;2007年

5 李侠;恶性肿瘤基因工程纳米疫苗抗肿瘤转移与复发作用的研究[D];第四军医大学;2007年

6 马斌;纳米药物载体对人树突状细胞的影响[D];第四军医大学;2007年

7 李文豪;先天性脊柱裂和肛门直肠畸形脊髓蛋白质双向电泳图谱差异分析[D];中国医科大学;2008年

8 汪镇南;HSP70作为禽流感病毒基因工程疫苗佐剂的研究[D];湖南农业大学;2008年

9 荀敏;HSP70在肝脏手术创伤时表达及与肝功能、GC、CRP关系的实验研究[D];广西医科大学;2010年

10 康利娜;Erp57在先天性脊柱裂和肛门直肠畸形胎鼠脊髓中表达的研究[D];中国医科大学;2010年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 李青;刘殿武;肖永红;刘辉;何海艳;;不同剂量不同载体不同途径的肝再生增强因子重组质粒抗大鼠肝纤维化疗效比较[J];第三军医大学学报;2006年18期

2 李霖;吴芳;李红;;重组腺病毒载体介导报告基因经多种途径转染至大鼠肾脏[J];基础医学与临床;2008年09期

3 邵秋杰,李青,金利华,赵一岭,张英华,林圣彩;胶质瘤中Axin基因点突变检测及表达研究[J];中华神经外科疾病研究杂志;2003年04期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 何浙生;;人类防病的新希望——基因疫苗[J];健康博览;1996年07期

2 谭德明,刘双虎,李聪智,刘国珍,燕美玉,孙科柱;乙型肝炎病毒全S基因疫苗诱导小鼠的特异性免疫应答[J];中国病毒学;2001年03期

3 ;法艾滋病基因疫苗实验取得进展[J];江苏药学与临床研究;2001年01期

4 李文波,张修礼,姚志强;乙型肝炎病毒基因疫苗诱导小鼠产生免疫应答的效应[J];临床消化病杂志;2003年05期

5 李晖,李榕,钟森,任红,陈宣世,史小玲,王明勇,龙汉安;结核分枝杆菌含信号肽的Mtb8.4/hIL-12嵌合基因疫苗免疫保护效果研究[J];中华微生物学和免疫学杂志;2005年10期

6 张巧;马千里;李琦;曾雪峰;王长征;;肺炎链球菌黏附素A基因疫苗的构建及对小鼠鼻咽部肺炎链球菌携带的防御作用[J];第三军医大学学报;2008年08期

7 时德仁,姚志强;肝炎病毒基因疫苗研究现状[J];实用肝脏病杂志;1997年02期

8 熊思东;徐薇;;基因免疫研究中的一些新动态[J];国外医学(微生物学分册);2001年01期

9 王洪军,王继群,殷震,胡晓芳;干扰素(IFN)与AIDS疫苗[J];生物技术;2002年06期

10 杨锦波,刘天佳,李继遥;抗龋基因疫苗pcDNA3-gtfB整合宿主细胞基因组DNA的可能性研究[J];华西口腔医学杂志;2003年03期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 岳朝晖;刘建国;王晶;赵靖;王伟;姜晶;管晓燕;张剑;;防龋基因疫苗pcDNA3-PAc不同途径免疫BALB/c小鼠的实验研究[A];全国第三次牙体牙髓病学临床技术研讨会论文汇编[C];2009年

2 姜晶;刘建国;王伟;耿发云;王怡丹;白朋元;亓鹏;;防龋基因疫苗pVAX1-SG免疫SD大鼠的实验研究[A];全国第三次牙体牙髓病学临床技术研讨会论文汇编[C];2009年

3 王伟;刘建国;亓鹏;姜晶;田源;白朋元;管晓燕;;防龋基因疫苗pVAX1-GC免疫SD大鼠的实验研究[A];全国第三次牙体牙髓病学临床技术研讨会论文汇编[C];2009年

4 裴宗飞;张文娟;牛钟相;;鸭补体C3d基因cDNA的克隆及鉴定[A];中国畜牧兽医学会2008年学术年会暨第六届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2008年

5 张文卿;徐腾飞;于红;刘颖;李丹;;Her2/neu-IL12融合基因疫苗的构建及其对小鼠乳腺癌的防治作用[A];肿瘤病因学研究与中西医结合肿瘤综合诊疗交流研讨会论文集[C];2009年

6 蒋桂花;王劲松;李国才;季明春;;NspA基因疫苗小鼠体内诱生特异性抗体的研究[A];中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要[C];2006年

7 徐薇;岳艳;桂俊;熊思东;;佐剂的递送与表达方式对基因疫苗诱导特异性免疫应答的作用[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年

8 王怡丹;刘建国;姜晶;王伟;亓鹏;白朋元;管晓燕;;防龋基因疫苗pVAX1-SPG免疫BALB/c小鼠的实验研究[A];全国第三次牙体牙髓病学临床技术研讨会论文汇编[C];2009年

9 任晓峰;石娜;崔进;孟凡丹;李训良;李鹏冲;斯琴高娃;王超;王鑫;吴丹;李广兴;;猪IL-15对PRRSV GP5基因疫苗免疫增强作用的研究[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集[C];2010年

10 蒋金凤;程安春;汪铭书;路立婷;;壳聚糖为递送载体的DEV gC基因疫苗诱导BALB/c小鼠体液和粘膜免疫发生的研究[A];第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛论文集（下册）[C];2010年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 ;基因疫苗防病——长期发展方向[N];中国中医药报;2000年

2 杨 骏;法试制新型艾滋病基因疫苗[N];中国高新技术产业导报;2003年

3 海文;基因疫苗临床研究新进展[N];中国医药报;2001年

4 杨骏;法试制新型艾滋病基因疫苗[N];医药经济报;2003年

5 通讯员 肖鑫;基因疫苗研制获重要进展[N];光明日报;2001年

6 记者 魏忠杰;癌症基因疫苗进入临床试验[N];新华每日电讯;2004年

7 张永兴;新加坡开发出预防哮喘基因疫苗[N];医药经济报;2004年

8 庄愉;基因疫苗研究的第三次革命[N];医药经济报;2001年

9 张建松;我国治疗性基因疫苗研究获重要突破[N];中国高新技术产业导报;2000年

10 张建松;治疗性基因疫苗研究获突破[N];医药经济报;2000年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 唐翌姝;1、细菌纳米磁小体为载体的基因疫苗研究2、同种异基因白细胞联合细胞瘤苗治疗肿瘤的初步研究[D];北京协和医学院;2012年

2 王鹤;HPV58mE6E7融合基因疫苗构建及其免疫效果的研究[D];广西医科大学;2011年

3 刘莉;可示踪的防龋基因疫苗构建、表达及其基因疫苗PELA微球的研究[D];四川大学;2003年

4 杨广民;联合应用MAGE-1与IL-18基因疫苗抗肝癌免疫治疗作用的实验研究[D];吉林大学;2010年

5 范雄林;结核分枝杆菌基因疫苗的构建及其免疫学特性的初步研究[D];第四军医大学;2001年

6 门静涛;日本血吸虫复合表位基因疫苗免疫研究[D];吉林大学;2009年

7 李艳佳;HPV16E7DNA疫苗和IL-15重组质粒的联合免疫作用及对树突状细胞表面分子的表达和功能的影响[D];河北医科大学;2005年

8 鞠会艳;犬瘟热病毒基因疫苗与重组犬腺病毒的构建及其实验免疫研究[D];吉林大学;2006年

9 林华;PRRSV变异株的分离鉴定、鉴别诊断和新型基因疫苗的研究[D];四川农业大学;2010年

10 孟祥俊;HSV-1糖蛋白B基因疫苗的构建及其预防单纯疱疹病毒性眼病的初步研究[D];吉林大学;2007年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 舒兵;鸭瘟病毒UL24基因疫苗的构建及其免疫效果的初步研究[D];四川农业大学;2011年

2 余霞;鸭瘟病毒UL24基因疫苗诱导鸭体液免疫及抗原动态分布的研究[D];四川农业大学;2012年

3 谢铮;人乳头瘤病毒16型E6E7基因疫苗的基础实验研究[D];扬州大学;2010年

4 沈福晓;鸭瘟病毒gC基因疫苗在雏鸭体内的抗原表达时相和分布规律[D];四川农业大学;2010年

5 王伟;免疫增效型广谱抗肿瘤血管生成基因疫苗的基础研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2010年

6 练蓓;鸭瘟病毒gC基因部分特征分析及gC基因疫苗诱导鸭免疫发生的研究[D];四川农业大学;2011年

7 徐良;猪传染性胸膜肺炎杆菌菌影装载猪源巴氏杆菌外膜蛋白H基因疫苗的免疫效果评价[D];天津农学院;2013年

8 王浩;基因疫苗免疫治疗多发性骨髓瘤小鼠明显延长生存期[D];昆明医学院;2011年

9 由田;编码糖蛋白B的裸基因疫苗诱导单纯疱疹病毒Ⅰ型感染小鼠的体液和细胞免疫[D];延边大学;2010年

10 蒋金凤;鸭肠炎病毒gC基因疫苗诱导BALB/c小鼠免疫发生的研究[D];四川农业大学;2010年

，

本文编号：1026897