缺氧对成年大鼠SVZ组织分离培养神经干细胞的影响

发布时间：2018-04-12 06:11

  本文选题：缺氧 + 室管膜室下区　； 参考：《西安交通大学学报(医学版)》2013年06期

【摘要】：目的探讨缺氧对体外培养的大鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖、分化和细胞凋亡的影响。方法分离成体SD大鼠室管膜室下区(subventricular zone,SVZ)组织,NSCs在常氧和低氧培养箱培养,光镜观察细胞形态;采用NSCs标记物(nestin)免疫荧光染色鉴定细胞,未成熟神经元标记物(β-tubulinⅢ/Tju-1)、星形胶质细胞标记物(GFAP)和少突胶质细胞标记物(O4)免疫荧光染色和细胞计数观察细胞的分化能力;WST-1检测细胞增殖能力;流式细胞仪和TUNEL法检测细胞凋亡。结果从成体SVZ组织中成功分离培养出NSCs;无血清诱导下细胞培养至第4代有部分细胞分化,多为胶质细胞;血清诱导后NSCs可以向神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化,大部分干细胞分化为Tju-1阳性细胞(53.8%±6.8%),部分为GFAP阳性细胞(21.6%±5.4%),少部分为O4阳性细胞(11.4%±4.5%)。一定时间(24h)的低氧(3mL/L氧浓度)可以促进NSCs增殖(P0.05),但长时间缺氧(24h),细胞增殖能力减弱而细胞凋亡比例增加(P0.01)。结论正常成体组织中存在NSCs;体外培养条件下分离培养的NSCs可以分化为多种类型细胞;短时间低氧可促进NSCs的增殖,而长时间缺氧导致细胞凋亡比例增加。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of hypoxia on proliferation, differentiation and apoptosis of neural stem cells in vitro.Methods cultured adult SD rats subventricular zonetin (SVZ) tissues were cultured in normoxic and hypoxic incubators, the morphology of cells was observed under light microscope, and the cells were identified by immunofluorescence staining with NSCs labeling.Immature neuronal markers (尾 -tubulin 鈪，

本文编号：1738498