PAX2慢病毒表达载体的制备及鉴定

发布时间：2018-04-14 07:12

  本文选题：PAX基因 + 慢病毒载体　； 参考：《现代预防医学》2013年15期

【摘要】：目的构建大鼠PAX2慢病毒表达载体,以期在大鼠肾脏中高效、稳定表达。方法设计引物引入AgeⅠ酶切位点,使用PCR方法从质粒pcDNA3.1-PAX2中扩增小鼠PAX2基因的编码区序列,对所扩增出的目的片段回收纯化。用In-Fusion技术将AgeⅠ内切酶消化后目的片段交换连接入AgeI酶切的pGC-FU载体,构建PAX2慢病毒表达载体pGC-FU-PAX2。酶切验证并测序正确后,将质粒pGC-FU-PAX2与慢病毒辅助包装载体共转染293T细胞,Western-blot验证PAX2在转染293T细胞中表达。结果通过PCR扩增获得了PAX2基因,将PAX2克隆到慢病毒转移质粒pGC-FU中,并在293T细胞中包装产生慢病毒颗粒。结论成功构建了PAX2慢病毒表达载体,为进一步从分子水平探讨PAX2功能奠定了基础。
[Abstract]:Objective to construct the expression vector of rat PAX2 lentivirus in order to express it efficiently and stably in rat kidney.Methods Primer was designed to introduce Age 鈪，

本文编号：1748235