同种大鼠腹腔异位心脏移植模型的建立和常山酮抗免疫排斥反应的研究

发布时间：2018-06-20 06:23

本文选题：大鼠同种腹腔异位心脏移植 + 常山酮　；参考：《吉林大学》2017年硕士论文

【摘要】：常山酮(Halofuginone HF),又名卤夫酮,是从中国草本植物常山中提取出来的一种生物碱。近年来,HF具有广泛的有益的生物活性。研究发现,HF不仅仅具有抗球虫的作用,还可以调节免疫系统的功能。有研究已经表明,HF在多种器官移植手术中可以有效的延长移植物的存活时间及受体的存活率。然而,HF在抗免疫排斥反应中对CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的作用机制没有研究。由于HF的药用价值不断的被研究证实,本文将通过HF在同种大鼠腹腔异位心脏移植术术后,受体在抗免疫排斥反应中的作用机制进行研究和讨论,本研究将为寻找治疗免疫排斥反应和解决器官移植中免疫排斥的方法提供部分理论依据。本实验的设计方案,以Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体,成功建立同种大鼠腹腔异位心脏移植模型,实验者总结了成功建立此模型的心得以及经验。本实验,通过HF作用于模型来分析HF在同种大鼠腹腔异位心脏移植手术中对CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的影响。将24只供体Wistar大鼠、24只受体SD大鼠各分组分为两组,A组移植手术前三天,手术后四天经口给予生理盐水,作为空白对照组,共12例;B组在移植手术前三天,手术后四天20mg/kg/d HF经口给药,作为给药组,共12例。术后每天观察和评估受体大鼠,通过B超、心电图,触诊观察移植物的存活时间以及搏动状况,在术后3d、5d、7d采取移植物做HE染色,观察心肌的损伤以及炎性细胞的浸润,在术后5d、7d,分别取A、B组的外周血、脾脏以及淋巴结进行流式细胞仪检测CD4~+CD25~+调节性T细胞(CD4~+CD25~+n Treg)的表达量。在术后第5d、第7d,分别取A、B组的脾脏进行荧光定量pcr检测脾脏中Foxp3~+的表达量。术后每天观察和评估结果:A组对照组,术后受体当天精神状态良好,进食进水正常,移植心脏搏动强而有力,心率约200次/min;术后第3d。受体反应以及饮食量减少,活动量也相对减少,取供心观察心脏部分开始变黑,心搏动减弱;术后第5d,受体反应同第3d,甚至反应更加迟钝,取供心肉眼观察颜色暗红发黑。B组给药组。术后受体当天精神状态良好,进食进水正常,移植心脏搏动强而有力,心率约200次/min;术后第3d、第5d状态同当天,分别取供心观察发现颜色无暗红,外观鲜红,无明显血栓及坏死组织。HE染色结果:第3d、第5d、第7d的心脏病理切片结果显示,A组空白组,低倍镜下观察,心肌损伤越来越严重,大量炎性细胞浸润。高倍镜下,心肌细胞肿胀、空泡变性严重。B组给药组,低倍镜下显示,心肌整体病变比空白组轻,心肌间可见炎性细胞的浸润也有水肿。在高倍镜下发现,偶见空泡变性,水肿较空白组轻,炎性细胞较空白组少。流式细胞仪检测结果:在术后第5d、第7d分别对A、B两组大鼠采集淋巴结、脾脏、外周血进行流式细胞仪分析检测,结果发现CD4~+CD25~+n Treg在淋巴结和脾脏有明显的的升高,在外周血中有明显下降。荧光定量pcr检测结果:在术后第5d、第7d分别对A、B两组大鼠采集脾脏进行荧光定量pcr检测,结果发现给药组脾脏中表达的Foxp3的基因表达量比空白组高,且显著。结论:成功建立了大鼠同种腹腔异位心脏移植手术模型,常山酮在大鼠异位心脏移植手术模型中具有抗免疫排斥的作用。
[Abstract]:The effects of HF on CD4 ~ + CD25 ~ + Foxp3 ~ + regulatory T cells were studied . The results showed that there were no dark red , bright red , no obvious thrombus and necrotic tissue in the heart . The results showed that the changes of CD4 ~ + CD25 ~ + n - Treg in lymph nodes and spleen were more and more severe than those in the blank group . Results : The gene expression of Foxp3 expressed in the spleen of rats was higher than that in blank group , and the results showed that the rat model of allogeneic heart transplantation was successfully established , and it had anti - immune rejection in the model of ectopic heart transplantation in rats .
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R654.2;R-332

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