氧氟沙星胶体金免疫层析试纸条的研制

发布时间：2020-02-01 11:16

【摘要】：氧氟沙星是最广泛使用的氟喹诺酮类药物之一,用于治疗人和动物不同病因的感染,是最有前景的抗菌化疗剂。氟喹诺酮可以通过抑制DNA回旋酶或拓扑异构酶II,从而抑制革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌。氧氟沙星在兽医学中的广泛使用使其通过动物源食物进入食物链,并对环境和人类健康带来重大风险。氧氟沙星的大量摄取可导致微生物形成抗性并引起病理状态,例如菌群失调,过敏反应,抑制一些酶的活性等。免疫层析试纸条(ICG)由于灵敏度高、简单、成本低、无需过多专业技能来操作,总体上比其它传统方法更经济,时间短,现在的应用已越来越普遍。ICG制备过程中影响重现性因素较多,需要详细研究考察。本研究以氧氟沙星为研究对象,胶体金作为标记物来标记氧氟沙星单克隆抗体,根据竞争抑制免疫层析原理研制出氧氟沙星胶体金ICG并对其进行包括胶体金与抗体结合的最佳条件、硝酸纤维素膜的型号、包被原稀释液、包被原稀释倍数、金标抗体复溶倍数、硝酸纤维素膜封闭液的选择、金标垫处理液的选择在内的各参数系统优化。在实验中,优化了检测氧氟沙星残留的胶体金免疫层析试纸条的工作条件。确定胶体金与抗体结合的最佳pH为9,最佳抗体量为18 μL;硝酸纤维素膜型号为Millipore HF135s;包被原稀释液为PB,金标垫处理液为PBST,方法检测限为10 ng/mL,牛奶样品的检测限为60 ng/mL。
【学位授予单位】：天津科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R392-33

【参考文献】