大鼠口腔黏膜对正畸托槽刺激反应的模型建立及免疫组化研究

发布时间：2020-05-18 09:58

【摘要】：目的:本实验通过在大鼠口腔内建模,模拟托槽对黏膜的机械及化学刺激。探究托槽对黏膜的刺激及去除托槽后的组织恢复情况,并对三种不同的托槽进行比较,为临床上医生和患者对正畸托槽的选择提供实验依据。方法:选用三月龄的健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠48只,适应性饲养一周后,将大鼠随机分组,实验组:国产自锁组(12只),进口自锁组(12只)国产方丝组(12只)。对照组:阴性对照(12只)。根据实验周期,每组又分为14天和28天各半。国产自锁组、进口自锁组、国产方丝组、阴性对照组每组6只,共8组。实验组将三种托槽采用相同缝合方法分别缝合于三组大鼠下前牙唇侧(自然状态下,下唇需覆盖托槽);阴性对照组采用相同缝合方法缝合。14天时,记录全部大鼠黏膜状态、体重,将14天组处死取材,28天组拆除托槽及缝线。28天时,记录28天组大鼠黏膜状态、体重,并处死取材。所有动物均以软食饲养,自由饮水,同环境下饲养至实验结束,切取的下唇黏膜均常规固定,脱水,包埋。石蜡切片后进行常规HE染色观察黏膜组织学变化;免疫组织化学方法检测CD4和CD8的表达,采用细胞图像分析系统进行免疫组化染色评分,以IHS值表示其强度。应用Image-pro-plus6.0图像分析系统进行半定量分析。所有数据结果均应用SPSS21.0统计软件进行处理,统计分析时不同实验组间采用秩和检验。对14天和28天时的CD4和CD8进行分析,检验水准α=0.05。结果:1.肉眼观察黏膜状态及HE染色,三种托槽在14天时均有不同程度的口腔黏膜反应出现,黏膜反应的严重程度由重到轻排序为:国产方丝国产自锁进口自锁。2.免疫组化测量CD4IHS值并进行统计学分析,国产自锁14天[91.5(15.5)],进口自锁14天[54.0(7.5)],国产方丝14天[115.5(21.0)]与阴性对照14天[42(25.5)]之间的差异有统计学意义(P0.05)。且三种托槽免疫反应程度为:国产方丝国产自锁进口自锁(P0.05)。在28天时三种托槽相比无差异(P0.05)。但黏膜的免疫反应均大于与阴性对照组(P0.05)。3.免疫组化测量CD8IHS值并进行统计学分析,国产自锁14天[105(19.5)],进口自锁14天[73.0(39.5)],国产方丝14天[130.5(19.5)]与阴性对照14天[49(22.5)]之间的差异有统计学意义(P0.05)。且三种托槽免疫反应程度为:国产方丝国产自锁进口自锁(P0.05)。在28天时,国产自锁与阴性对照组无差异(P0.05)。其余两组与阴性对照组相比有差异(P0.05)。结论:1.成功建立托槽对黏膜刺激的大鼠模型。2.不同种类的托槽对口腔黏膜的损伤有不同,在实验的三种托槽中,方丝托槽损伤最重,进口自锁托槽损伤最轻。3.托槽对黏膜有一定的机械损伤及免疫影响,去除托槽后机械损伤逐渐恢复趋于正常,免疫反应也有好转。
【图文】：

大鼠,托槽,粘接,牙齿生长

德国 EPPENDORF箱，江苏太仓医用仪器厂 DSHZ-300 的戴用在临床上的使用，应考虑粘接托槽与大齿过小，无法粘接托槽，且大鼠下前接于下前牙，就会随牙齿生长移动，无槽稳定与下唇黏膜接触，且不易脱落，，体实验操作如下：实验组动物称重后腔注射，将实验动物全身麻醉（如图 1

大鼠,托槽,实验组,鼠笼

图 2 大鼠的固定及铺巾Fig. 2 Fixation and towel laying in rats十字法”分别将三种托槽缝合于下前牙唇侧牙龈处。其侧卧于鼠笼，密切观察其各项生命指征，注意维持醒。托槽的缝合时间为 14 天，缝合期间每天观察治器脱落，立即将其重新缝合，以保证大鼠下唇与器就位时，大鼠在闭口时下唇完全覆盖金属托槽。式麻醉、铺巾、消毒，采用相同的“十字法”将缝线下饲养至实验结束。全部实验组及阴性对照组在第 10%水合氯醛 0.3ml/100g 腹腔注射麻醉，拍摄口内缝线。14 天组于第 14 天处死取材，28 天组于第，继续饲养至第 28 天处死取材。本的采集治器后所有动物自由饮水进食。实验组、对照组动
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R783.5;R-332

【参考文献】