一种改良的兔尿道狭窄模型建立方法的研究

发布时间：2020-05-21 13:11

【摘要】：目的:通过对兔尿道狭窄建模方法的改良,探寻一种经济、简便以及可重复性高的模型建立方法,为后续尿道狭窄发生机制的研究奠定基础。方法:本实验选用成年雄性新西兰兔28只,随机数字表法按照1:3:3的比例分组:正常对照组,4只,仅行输尿管镜尿道检查;常规模型组,12只,采用自制电刀头对前尿道行环形电凝,长约5mm,直到尿道粘膜苍白;改良模型组,12只,采用输尿管镜直视下用自制电凝导丝行前尿道点状环形电凝长约5mm,深达粘膜下层。建模后第30天,行逆行尿道造影和输尿管镜尿道检查评估尿道狭窄的形成情况,取相应手术部位组织行组织病理学检查,同时采用免疫组织化学法及实时定量PCR检测组织中TGF-β1、Smad3、MMP1 m RNA及蛋白的表达变化。结果:1、兔尿道狭窄模型形成情况:经过逆行尿道造影及尿道镜检查,正常对照组4只兔常规喂养未出现死亡及尿道狭窄。常规模型组12只兔发现3只形成尿道狭窄,5只形成尿道闭锁,3只并发尿瘘,1只死亡。改良模型组12只兔均发现尿道存在明显狭窄,未出现兔死亡。2、在两组模型中,TGF-β1、Smad3、MMP1 m RNA及蛋白的表达水平均高于正常对照组(P0.05)。在两组模型之间,常规模型组Smad3、MMP1 m RNA的表达水平明显高于改良模型组(P0.05),TGF-β1 m RNA的表达水平无明显差异(P0.05)。在两组模型之间,TGF-β1、Smad3、MMP1蛋白的表达水平无明显差异(P0.05)。结论:1、兔尿道狭窄瘢痕组织中TGF-β1、Smad3、MMP1 m RNA及蛋白的表达水平均增高。2、改良模型组采用输尿管镜直视下点状环形电凝可成功建立尿道狭窄模型,成功率高、方法简便及可重复性高,可作为雄性兔尿道狭窄模型建立的有效方法。常规模型组并发症多,可形成尿道闭锁、尿瘘导致兔死亡,不宜作为兔尿道狭窄模型建立的方法。
【图文】：

导尿管可以顺利进入成年雄性新西兰兔尿道，按照F8号导尿管直径估算兔尿道内径，制作球形电刀头一根，并于外层套入热塑管标记刻度，便于术中电刀头进入尿道后长度的测量（见图1A、B）。图1 自制电刀头设备的组成及电凝过程（A：自制电刀头设备与普通短电刀头对比；B：自制电刀头设备接入普通电刀笔；C：兔腹部剃毛后负极板粘贴，会阴部常规消毒；D：使用自制电刀头接入普通电刀笔，电凝功率设定60W，按实验方法进行电凝建模过程。）②尿道狭窄模型制作 采用10%水合氯醛（300mg/kg）行腹腔注射麻醉，约5min麻醉成功后，兔取仰卧位置于操作台上，固定四肢，，使用动物专用剃毛器将兔腹部体毛剃除便于电刀负极板粘贴，使用聚维酮碘会阴部常规消毒。手术者使用自制电刀头接入普通电刀笔，电凝功率设定60W。电刀头进入尿道5.0cm处固定

导丝尾端刮去涂层部分使用绝缘胶布与普通电刀头金属端妥善固定（见图2）。图2 自制电凝导丝设备的组成（A：取导引导丝插入F3号输尿管插管中，导丝头部超出输尿管插管约3.0mm，使用502胶水将导丝头部与输尿管插管粘连固定。B：手术室常规使用GD350-B型高频电刀。C：导丝尾端刮去涂层部分与普通电刀头使用绝缘胶布固定。）② 尿道狭窄模型制作 采用10%水合氯醛（300mg/kg）行腹腔注射麻醉，约5min麻醉成功后，兔取仰卧位置于操作台上，固定四肢，使用动物专用剃毛器将兔腹部体毛剃除便于电刀负极板粘贴，使用聚维酮碘会阴部常规消毒。使用F8/9.8输尿管镜，在等渗冲洗液冲洗下直视进入兔尿道外口，观察整段尿道，于精阜远端约3.0cm处（距离尿道外口约5.0cm，与常规模型组电凝位置相同）固定输尿管镜镜体
【学位授予单位】：遵义医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R699.6;R-332

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本文编号：2674351