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鼻内胰岛素给药可通过促进海马神经发生改善术后认知

发布时间:2020-05-22 15:34
【摘要】:目的:本研究探讨鼻内胰岛素给药是否可通过促进海马神经发生从而改善昆明小鼠术后认知功能,并就可能机制进行初步探讨。方法:采用老龄昆明小鼠作为实验对象,先测定胰岛素鼻内吸入的安全剂量,设置胰岛素吸入剂量梯度0.0、0.5、1.0、2.0IU,检测给药3小时后小鼠血糖情况。进一步实验分为空白组、手术组和手术+胰岛素组,各组含1、2、3三个亚组,手术组、手术+胰岛素组小鼠以开腹探查模拟手术刺激,并检测术后血糖。手术+胰岛素组小鼠术前三小时及术后三天予以胰岛素鼻内给药,手术组及空白组予以等量生理盐水处理。空白组、手术组和手术+胰岛素组第1亚组术后7天予以新物体识别任务实验。第2亚组术后7天脑组织取材,经Brdu与Dcx双标记,荧光显微镜下计数两侧海马齿状回新生神经细胞数目;选取第2亚组脑组织切片做免疫组化,普通光学显微镜下观察GSK3β的表达。第3亚组术后7天Western Blot得到蛋白条带,通过Image J软件分析灰度值,比较p-GSK3β量的差异。结果:1.昆明小鼠单次鼻内胰岛素给药0.5或者1 IU对小鼠血糖无明显影响,2 IU有影响;单次1 IU给药对小鼠手术术后血糖无明显影响。2.在训练期,手术组与手术+胰岛素组小鼠在术后没有显著的探索偏差;在测试期,手术+胰岛素组小鼠术后探索新物体的兴趣偏好明显高于手术组。3.给予鼻内胰岛素处理的小鼠术后海马齿状回DCX/Brdu阳性细胞数高于手术组。4.免疫组化结果提示给予鼻内胰岛素处理小鼠术后海马齿状回GSK3β的总量没有明显变化,Western Blot分析提示鼻内胰岛素处理小鼠术后海马p-GSK3β的量相对增多。结论:鼻内胰岛素给药可通过促进海马神经发生改善昆明小鼠术后认知功能。
【图文】:

鼻内,给药,胰岛素,小鼠


药应期,该期内所有小鼠全部依次在鼻给药操作由两人完成,一人双手枪吸取 10 ul 生理盐水分数次交小鼠头部固定避免小鼠甩落。滴完段是正式给药期,给药时间包含手在术前 3 小时进行,手术+胰岛素 10ul(共 1 IU),手术组及空白组午 9 : 00 同样给药一次。

麻醉方法,开腹


定在手术台上,络合碘棉签消毒小鼠腹部三次后铺巾。选择腹部正约 0.5cm 处做纵行切口,,切口长约 2.5cm。由助手协助夹起腹部皮依次切开皮肤、肌肉、腹膜,暴露腹腔。将部分小肠牵出切口使用,轻轻挤压 3 分钟后放回腹腔。依解剖层次单纯间断缝合关腹,伤无菌敷料贴覆盖固定。操作完成后解除束缚,恢复正常体位。
【学位授予单位】:南华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:R614;R-332

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本文编号:2676210

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