丝裂霉素缓释粒子治疗胰腺癌动物模型的实验研究

发布时间：2020-08-07 03:42

【摘要】：背景胰腺癌是常见恶性程度很高同时预后较差的消化系统肿瘤,近年来全球发病率呈明显上升趋势。由于胰腺癌的生物学及病理特点,缺乏特异性症状,早期诊断比较困难,大多数患者确诊时已经处于中晚期,多发生邻近脏器及远处转移,外科手术切除率很低,获得根治性手术的患者5年存活率仅约20%。目前全身静脉化疗仍是临床上胰腺癌的主要治疗手段。由于胰腺癌为乏血供肿瘤,在进行全身化疗时,能到达肿瘤病灶发挥作用的药物剂量很低;提高化疗药物的使用剂量,将会增加化疗药物所带来的严重全身毒副反应,如恶心、呕吐、食欲不振、骨髓抑制等;患者往往因为难以耐受化疗不得不终止治疗。近年来缓释给药技术取得了很大的研究进展。间质化疗越来越多的被用于临床研究中。间质化疗就是将化疗药物与特定载体结合制备成复合物,通过超声、CT等影像技术引导将化疗药物植入瘤体内部,利用载体在病灶局部缓慢降解的特点,化疗药物长期缓慢释放,发挥作用时间长,并且化疗药物在瘤体内形成较高的治疗浓度,在增加疗效的同时,还能减轻全身毒副作用。胰腺癌的间质化疗研究显示间质化疗能够有效地控制胰腺癌细胞生长,同时降低化疗药物的不良反应。目的本研究通过建立裸鼠胰腺癌模型,将特定载体和丝裂霉素药物混合制成丝裂霉素缓释粒子,将丝裂霉素缓释粒子植入裸鼠胰腺癌瘤体内,分析丝裂霉素缓释粒子治疗胰腺癌的疗效及局部药物浓度,为超声内镜引导下进行胰腺癌间质化疗的临床应用提供实验依据。方法1.实验室传代培养SW1990胰腺癌细胞株,收集细胞种植于Balb/c-nu裸鼠皮下,定期观察并测量瘤体大小,约3周成功建立裸鼠胰腺癌皮下成瘤模型并记录瘤体体积。2.选用24只成瘤BALB/C裸鼠,完全随机分为四组,丝裂霉素粒子组(小鼠瘤体内植入丝裂霉素化疗粒子0.39mg/只(含丝裂霉素标准品0.08mg))、丝裂霉素针剂组(小鼠瘤体内注入注射用丝裂霉素0.1ml(含丝裂霉素0.08mg))、丝裂霉素粒子基质组(小鼠瘤体内植入丝裂霉素粒子基质1粒/只(基质0.31mg))、生理盐水对照组(小鼠瘤体内注射生理盐水0.1ml/只)。3.在给药前及给药后的第3、6、9、12、14天测量肿瘤长径、宽径和厚度,计算瘤体体积,绘制肿瘤生长曲线图,同时观察记录各组小鼠体质量、精神状态变化。4.两周后处死全部试验裸鼠,取出完整瘤体并称重,计算各组小鼠瘤体体积变化。5.通过高效液相色谱法检测丝裂霉素粒子组和丝裂霉素针剂组裸鼠瘤体内丝裂霉素浓度。结果成功制备裸鼠胰腺癌模型,与丝裂霉素粒子基质组和生理盐水对照组小鼠比较,丝裂霉素粒子组和丝裂霉素针剂组小鼠治疗6天开始,小鼠瘤体体积明显低于丝裂霉素粒子基质组和生理盐水对照组小鼠(P均0.05)。与丝裂霉素针剂组小鼠比较,丝裂霉素粒子组小鼠治疗9天开始瘤体体积明显低于丝裂霉素针剂组小鼠(P0.05)。与丝裂霉素针剂组小鼠比较,丝裂霉素粒子组小鼠胃肠道等毒性反应持续时间短,症状轻(P0.05)。高效液相色谱法检测显示,丝裂霉素粒子组小鼠瘤体内丝裂霉素浓度为(0.76±0.41)ng/m L组织,丝裂霉素针剂组瘤体内丝裂霉素浓度低于检测下限,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论丝裂霉素缓释粒子能够显著抑制裸鼠胰腺癌移植瘤瘤体生长,可以达到较高的瘤体内局部药物浓度,降低全身毒性反应,由于粒径小于超声内镜穿刺针针径,可能在超声内镜引导用于胰腺癌的临床治疗。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R735.9;R-332
【图文】：

裸鼠胰腺癌细胞皮下成瘤方法

织样(A)、丝裂霉素标准品(B)和丝裂霉素粒子组瘤体内的色谱线及定量下限 取未给药组小鼠瘤体组织匀浆液 1 ml，分g·mL-1丝裂霉素溶液，配制成浓度分别为 50 ng·mL-1、mL-1、500 ng·mL-1、1000 ng·mL-1、2000 ng ·mL-1标准理方法，取系列浓度的标准液 5 ul 进样分析，以丝裂霉素织样品浓度进行线性回归的标准曲线方程为 y=40.1699,最低浓度点的x值RSD为1.48，丝裂霉素在50 ng·mL-1围内线性关系良好。定量下限为 100 ng·mL-1。见表 3，图 小鼠胰腺癌移植瘤瘤体组织中不同浓度丝裂霉素 HPLC 检测的峰峰面积-1 峰面积-2 均峰面积

【参考文献】

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本文编号：2783426