去分化间充质干细胞成骨再分化潜能的实验研究
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南京医科大学学报第33卷第8期南报2013年8月将MSCs与De-MSCs两组细胞同时成骨诱导7d后检测成骨相关基因，发现以MSCs为对照，De-MSCs再成骨后基因表达明显高于MSCs成骨，Runx2表达增加约3倍，BMP2增加约4．5倍，Os-terix增加约14倍（P＜0．01，图4），表明De-MSCs有更强的成骨分化潜能，成骨分化效率更高，诱导后的成骨基因表达比未诱导状态更加明显。2．5ALP活性检测ALP是成骨细胞活动产物，浓度值正相关于成骨能力，是反映成骨能力敏感指标。De-MSCs与MSCs同时成骨诱导14d，分别记为MSC-obs和De-MSC-obs。收集上清检测ALP浓度值，结果显示De-MSC-obs显著高于MSC-obs（MSC-obs组0．58±0．015，De-MSC-obs组0．720±0．006，P＜0．01），说明De-MSCs成骨分化能力较MSCs更强（图5）。MSCsMSCs-obsDe-MSCs图1光镜下观察MSCs、MSCs-obs及De-MSCs形态（×50）Figure1ThemorphologyofMSCs，MSC-obsandDe-MSCs（×50）CD34CD105CD29CD45HLA-DR图2流式细胞仪检测De-MSCs表达部分MSCs表面标志Figure2ThesurfacemarkersofDe-MSCsdetectedbyFACS与同时间点的MSCs比较，**P＜0．01（n＝5）。图3CCK8检测De-MSCs细胞增殖能力增强Figure3ProliferationpotentialofDe-MSCsincreaseddetectedbyCCK83210D（450nm）1d3d5d7d时间********MSCDe-MSC20151050相对表达量******MSCDe-MSCRunx2BMP2Osterix与同时间点的MSCs比较，**P＜0．01（n＝3）。图4qPCR检测De-MSCs再次成骨诱导后相关基因表达高于MSCsFigure4Theosteogenicrelated-geneexpressionsofDe-MSCswerehigherthanMSCsdetectedbyqPCR·1046·
南京医科大学学报第33卷第8期南报2013年8月将MSCs与De-MSCs两组细胞同时成骨诱导7d后检测成骨相关基因，发现以MSCs为对照，De-MSCs再成骨后基因表达明显高于MSCs成骨，Runx2表达增加约3倍，BMP2增加约4．5倍，Os-terix增加约14倍（P＜0．01，图4），表明De-MSCs有更强的成骨分化潜能，成骨分化效率更高，诱导后的成骨基因表达比未诱导状态更加明显。2．5ALP活性检测ALP是成骨细胞活动产物，浓度值正相关于成骨能力，是反映成骨能力敏感指标。De-MSCs与MSCs同时成骨诱导14d，分别记为MSC-obs和De-MSC-obs。收集上清检测ALP浓度值，结果显示De-MSC-obs显著高于MSC-obs（MSC-obs组0．58±0．015，De-MSC-obs组0．720±0．006，P＜0．01），说明De-MSCs成骨分化能力较MSCs更强（图5）。MSCsMSCs-obsDe-MSCs图1光镜下观察MSCs、MSCs-obs及De-MSCs形态（×50）Figure1ThemorphologyofMSCs，MSC-obsandDe-MSCs（×50）CD34CD105CD29CD45HLA-DR图2流式细胞仪检测De-MSCs表达部分MSCs表面标志Figure2ThesurfacemarkersofDe-MSCsdetectedbyFACS与同时间点的MSCs比较，**P＜0．01（n＝5）。图3CCK8检测De-MSCs细胞增殖能力增强Figure3ProliferationpotentialofDe-MSCsincreaseddetectedbyCCK83210D（450nm）1d3d5d7d时间********MSCDe-MSC20151050相对表达量******MSCDe-MSCRunx2BMP2Osterix与同时间点的MSCs比较，**P＜0．01（n＝3）。图4qPCR检测De-MSCs再次成骨诱导后相关基因表达高于MSCsFigure4Theosteogenicrelated-geneexpressionsofDe-MSCswerehigherthanMSCsdetectedbyqPCR·1046·
南京医科大学学报第33卷第8期南报2013年8月将MSCs与De-MSCs两组细胞同时成骨诱导7d后检测成骨相关基因，发现以MSCs为对照，De-MSCs再成骨后基因表达明显高于MSCs成骨，Runx2表达增加约3倍，BMP2增加约4．5倍，Os-terix增加约14倍（P＜0．01，图4），表明De-MSCs有更强的成骨分化潜能，成骨分化效率更高，诱导后的成骨基因表达比未诱导状态更加明显。2．5ALP活性检测ALP是成骨细胞活动产物，浓度值正相关于成骨能力，是反映成骨能力敏感指标。De-MSCs与MSCs同时成骨诱导14d，分别记为MSC-obs和De-MSC-obs。收集上清检测ALP浓度值，结果显示De-MSC-obs显著高于MSC-obs（MSC-obs组0．58±0．015，De-MSC-obs组0．720±0．006，P＜0．01），说明De-MSCs成骨分化能力较MSCs更强（图5）。MSCsMSCs-obsDe-MSCs图1光镜下观察MSCs、MSCs-obs及De-MSCs形态（×50）Figure1ThemorphologyofMSCs，MSC-obsandDe-MSCs（×50）CD34CD105CD29CD45HLA-DR图2流式细胞仪检测De-MSCs表达部分MSCs表面标志Figure2ThesurfacemarkersofDe-MSCsdetectedbyFACS与同时间点的MSCs比较，**P＜0．01（n＝5）。图3CCK8检测De-MSCs细胞增殖能力增强Figure3ProliferationpotentialofDe-MSCsincreaseddetectedbyCCK83210D（450nm）1d3d5d7d时间********MSCDe-MSC20151050相对表达量******MSCDe-MSCRunx2BMP2Osterix与同时间点的MSCs比较，**P＜0．01（n＝3）。图4qPCR检测De-MSCs再次成骨诱导后相关基因表达高于MSCsFigure4Theosteogenicrelated-geneexpressionsofDe-MSCswerehigherthanMSCsdetectedbyqPCR·1046·
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本文编号：2811107
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