miR-152-3p对血管平滑肌细胞的作用及其机制研究

发布时间：2020-10-17 22:01

　　 目的:研究miR-152-3p对血管平滑肌细胞(VSMCs)的作用及机制。方法:使用ox-LDL刺激血管平滑肌细胞,用ApoE基因敲除小鼠建立动脉粥样硬化动物模型。使用qRT-PCR检测miR-152-3p和转化生长因子-B2(TGFB2 Mrna)表达水平。分别使用CCK-8实验、transwell实验和TUNEL实验检测VSMCs增殖、迁移和凋亡。通过生物信息分析预测miR-152-3p的下游靶点。MiR-152-3p和TGFB2之间的相互作用通过双荧光素酶实验、qRT-PCR和Western blot进行验证。结果:在动脉粥样硬化小鼠主动脉平滑肌细胞和受到ox-LDL处理的VSMCs中miR-152-3p表达水平显著下调,并表现出浓度和时间依赖特性。过表达miR-152-3p显著抑制了VSMCs的增殖和迁移,诱导了细胞凋亡。从机制上来看,miR-152-3p通过靶向作用于TGFB2发挥作用。结论:miR-152-3p通过靶向抑制TGFB2抑制VSMCs的异常增殖和迁移。
【文章目录】：
1 资料与方法
    1.1 实验材料
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养、转染和分组
        1.2.2 AS小鼠的构建
        1.2.3 miR-152-3p和TGFB2mRNA的检测
        1.2.4 TGFB2表达检测
        1.2.5 双荧光素酶实验验证miR-152-3p和TGFB2的相互结合关系
        1.2.6 CCK-8实验检测VSMCs增殖活性
        1.2.7 Transwell实验检测VSMCs迁移能力
        1.2.8 TUNEL检测VSMCs凋亡情况
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 miR-152-3p在AS小鼠和受到ox-LDL刺激的VSMCs中的表达
    2.2 miR-152-3p对VSMCs增殖、迁移和凋亡的影响
    2.3 miR-152-3p靶向调控TGFB2
    2.4 过表达TGFB2对miR-152-3p作用的逆转
    2.5 miR-152-3p在小鼠体内对TGFB2的影响
3 讨论

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本文编号：2845360