阿加曲班对MCAO大鼠不同时间点血小板功能的影响

发布时间：2020-10-21 23:45

　　 建立大脑中动脉闭塞(model of middle cerebral artery occlusion, MCAO)大鼠模型,研究阿加曲班对大鼠不同时间脑缺血再灌注损伤血小板功能的影响。将120只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)和阿加曲班给药组(Argatroban),其中Argatroban组分为4组:Argatroban+30 min组、Argatroban+1 h组、Argatroban+3 h组和Argatroban+7 h组,Sham组和Model组40只,其余各组每组10只。线栓法制备大鼠MCAO模型,术中输注Argatroban,剂量为0.3μg·kg-1·min-1,完成手术前5 min停止输注。手术完成后,Sham组和Model组分别于术后30 min、1 h、3 h和7 h处死10只取样;Argatroban给药组5个时间点处死取样。检测大鼠血浆血细胞数量,并计数骨髓有核细胞数的变化。采用流式细胞仪检测血小板-白细胞聚集体(platelet-leukocyte aggregates, PLA)表达水平,观察活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time, APTT)、血小板计数变化,ELISA检测血浆D-二聚体和TAT。结果显示,与Sham组相比,Model组大鼠的红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、血红蛋白含量(HGB)和中性粒细胞(GR)数都显著升高(p0.05),且与给药组没有统计学差异。Sham组、Model组和Argatroban给药组的骨髓有核细胞数也没有统计学差异。与Sham组相比,Model组PLA表达水平极显著升高(p0.01),Argatroban+30 min组PLA表达水平却低于Sham组,但没有统计学差异,Argatroban+1 h组高于Sham组和Argatroban+30 min组(p0.05),Argatroban+3 h组和Argatroban+7 h组高于Argatroban+1 h组低于Sham组。术后各组的血小板计数均高于Sham组(p0.05),Argatroban各组的血小板计数要低于Model组(p0.05),并在30 min时达到最低,30 min以后血小板升高,但是1 h以后血小板不再升高,趋于稳定。Argatroban各组PT和APTT虽略有降低,但是与Sham组和Model组并没有统计学差异。造模后各组TAT、D-二聚体水平显著升高,Argatroban各组TAT水平较模型组明显降低(p0.05),Argatroban+30 min组水平最低。MCAO模型大鼠血液呈现高凝状态,凝血功能和纤维蛋白溶解功能亢进,血小板活化增强,阿加曲班可对此起到改善作用。
【部分图文】：

Model组的PLA表达水平与Sham比较显著升高(p>0.05)，而Argatroban给药组的PLA表达水平显著性降低(p<0.05)，其中Argatroban+1 h组PLA的表达水平显著性低于其它Argatroban给药组。Argatroban+3 h组和Argatroban+7 h组PLA表达水平没有统计学差异(各组均取10只大鼠)(图2)。1.3 各组大鼠血浆APTT观测时间和血小板计数结果比较

各组大鼠血浆APTT分别观测30 min、1 h、3 h和7 h时ATPP值和血小板计数。从结果中可以看出Sham组的血小板计数为(430±69.3)，而ATPP值为(32.71±9.31)，它们之间并没有统计学差异(图3)。同理，Model、Argatroban+30 min、Argatroban+1 h、Argatroban+3 h和Argatroban+7 h均没有统计学差异(各组均取10只大鼠)。1.4 各组大鼠血浆TAT及D-二聚体含量

对各组大鼠血浆TAT及D-二聚体含量的测量结果表明(表2)，与Sham组相比，Model组及各Argatroban给药组血浆TAT及D-二聚体含量水平均显著升高，表明差异有统计学意义(p<0.05)；与Mode组相比，Argatroban给药组血浆TAT量水平均降低(p<0.05)，但Model组与Argatroban+3 h组和Argatroban+7 h组D-二聚体含量没有统计学差异；各给药组之间TAT比较，Argatroban+1 h组的TAT含量最低(p<0.05)，而Argatroban+3 h组和Argatroban+7 h组之间TAT含量没有统计学差异，1 h后大鼠血浆TAT含量开始升高，Argatroban+3 h组和Argatroban+7 h组TAT含量明显高于Argatroban+30 min组。各给药组之间D-二聚体比较，Argatroban+30 min组和Argatroban+1 h组D-二聚体含量最低(p<0.05)，但这两组之间没有统计学差异，Argatroban+3 h组和Argatroban+7 h组D-二聚体含量也没有统计学差异，但是高于Argatroban+30 min组和Argatroban+1 h组(p<0.05)(表2)。2 讨论
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