全自动染色机在骨髓组织脱钙中的改造应用

发布时间：2020-10-22 01:01

　　 正骨髓组织富含钙盐,故制片前需要脱钙处理,脱钙不全或脱钙过度均可影响骨髓组织切片的H-E染色或免疫组织化学染色效果,降低病理诊断的准确率。笔者前期配制了一种适合骨髓组织脱钙的改良EDTA脱钙液,可在24h内使骨髓组织脱钙完全,有利于提高骨髓疾病诊断的准确性[1]。为提高工作效率,同时避免人工操作误差,使脱钙过程稳定,本研究尝试将MYR SS-30全自动染色机改造应用于骨髓组织的EDTA脱钙处理中,并探讨最佳的EDTA脱钙程序和脱钙时间,以便使后期临床工作流程标准化、规范化。
【部分图文】：

改造前后染色架

切片行常规H-E染色,免疫组织化学染色采用EnVision两步法。由两名高级职称病理医师阅片判定H-E染色及免疫组织化学染色效果。表1 MYR SS-30染色机脱钙程序(16 h)Tab 1 Decalcification procedure of MYR SS-30 staining machine (16 h) 步骤 缸位 试剂 时间(min∶s) 抖动(s) 上下震荡(次) 1 1,2 10%中性福尔马林(装载) 30∶00(×2) 1(×2) 10(×2) 2 3,4 蒸馏水 30∶00(×2) 1(×2) 10(×2) 3 5 EDTA 59∶59 1 10 4 10 空白缸 00∶01 0 0 5 5,6 EDTA 59∶59(×2) 1(×2) 10(×2) 6 10 空白缸 00∶01 0 0 7 6,7 EDTA 59∶59(×2) 1(×2) 10(×2) 8 10 空白缸 00∶01 0 0 9 7,8 EDTA 59∶59(×2) 1(×2) 10(×2) 10 10 空白缸 00∶01 0 0 11 8,9 EDTA 59∶59(×2) 1(×2) 10(×2) 12 10 空白缸 00∶01 0 0 13 9,11 EDTA 59∶59(×2) 1(×2) 10(×2) 14 10 空白缸 00∶01 0 0 15 11,12 EDTA 59∶59(×2) 1(×2) 10(×2) 16 10 空白缸 00∶01 0 0 17 12,13 EDTA 59∶59(×2) 1(×2) 10(×2) 18 10 空白缸 00∶01 0 0 19 13 EDTA 59∶59 1 10 20 14 蒸馏水 15∶00 1 10 21 15,16 70%酒精(卸载) 00∶01 0 0

经手工EDTA脱钙及全自动染色机EDTA脱钙骨髓组织免疫组织化学染色阳性定位准确(图4);经手工EDTA脱钙与全自动染色机EDTA脱钙时间分别为16,18,20及22 h骨髓组织相比,Kappa,Ki-67,Lambda和MPO 4个抗体表达阳性率差别均无统计学意义(P>0.05,表2);经全自动染色机EDTA不同脱钙时间骨髓组织在上述指标免疫组织化学表达差别无统计学意义(P>0.05,表3)。表2 不同脱钙处理骨髓免疫组织化学染色Tab 2 Immunohistochemical expression under different decalcification procedures 染色机EDTA脱钙(16 h) 手工EDTA脱钙 高表达 低表达 Kappa 高表达 25 4 低表达 1 0 Ki-67 高表达 25 3 低表达 1 1 Lambda 高表达 25 1 低表达 0 4 MPO 高表达 27 1 低表达 0 2
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本文编号：2850858