WalK（S221P）突变影响万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌毒力的作用

发布时间：2021-05-26 17:14

　　目的探讨WalK（S221P）突变对万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌（vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus, VISA）毒力的影响及其机制。方法采用转录组测序比较VISA菌株XN108及其WalK（S221P）回复菌株K65的毒力基因表达差异,利用RT-qPCR检测菌株毒力基因的表达变化,溶血实验比较菌株的溶血能力。采用同源重组技术在金葡菌中引入WalK（S221P）突变,E-test检测菌株的耐药性。凝胶阻滞实验（EMSA）检测WalKR对靶基因调控区的结合能力。结果转录组测序结果显示,K65中多种重要毒力因子基因的表达上调（P<0.01）,调控系统Agr的活性增强,溶血能力恢复。将WalK（S221P）突变引入USA300菌株后,其耐药性升高,毒力因子表达水平及溶血活性降低;EMSA证实WalKR对金葡菌Agr有直接调控作用;敲除agrA基因后,引入WalK（S221P）突变仍可使USA300agrA对万古霉素的耐药性升高,但毒力基因的表达水平及溶血活性改变不显著。结论 WalK（S221P）突变影响VISA毒力是通过Agr... 

【文章来源】：第三军医大学学报. 2020,42(03)北大核心CSCD

【文章页数】：10 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验菌株、质粒与试剂
    1.2 转录组测序与分析
    1.3 RT-qPCR
    1.4 溶血实验
    1.5 突变菌株构建
    1.6 E-test实验
    1.7 EMSA实验
    1.8 统计学处理
2 结果
    2.1 WalK(S221P)突变回复后金葡菌主要毒力基因表达上调
    2.2 WalK(S221P)突变回复后金葡菌溶血能力增强
    2.3 在强毒力MRSA菌株中引入WalK(S221P)突变后万古霉素耐药性升高
    2.4 引入WalK(S221P)突变后金葡菌毒力基因表达水平及溶血能力下降
    2.5 WalKR对Agr具有直接调控作用
    2.6 WalK(S221P)突变通过Agr影响VISA菌株的毒力
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]SigB（Q225P）突变促进金黄色葡萄球菌生物被膜形成[J]. 刘慧,尚伟龙,彭华刚,周坤,胡珍,周人杰,饶贤才.  第三军医大学学报. 2017(08)



本文编号：3206746