小鼠高糖记忆模型中足细胞向上皮间质细胞转化的转录组学分析

发布时间：2021-06-21 04:59

　　目的探讨小鼠高糖记忆模型中足细胞向上皮间质细胞转化（EMT）的机制。方法将小鼠肾小球足细胞分为4组:正糖组（5.5 mmol/L D-葡萄糖）、高糖组（30 mmol/L D-葡萄糖）、记忆组（先30 mmol/L D-葡萄糖,后5.5 mmol/L D-葡萄糖）、渗透压组（5.5 mmol/LD-葡萄糖+24.5 mmol/L甘露醇）,除记忆组作用96 h外,其余组均作用48 h。Western blotting及免疫荧光检测各组足细胞EMT指标肾病蛋白（Nephrin）及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。采用Illumina HiSeq 2000进行正糖组、高糖组及记忆组的转录组测序,DESeq鉴定差异表达基因,并对差异表达基因进行GO及KEGG富集分析。最后采用实时荧光定量PCR检测差异表达基因的表达。结果与正糖组相比,Western blotting与免疫荧光检测均显示高糖组与记忆组的足细胞Nephrin表达减少、α-SMA表达增加（P<0.05）,而渗透压组与正糖组,记忆组与高糖组足细胞Nephrin、α-SMA的表达差异无统计学意义（P>0.05）。RNA... 

【文章来源】：解放军医学杂志. 2020,45(02)北大核心CSCD

【文章页数】：9 页

【图文】：

小鼠足细胞实时荧光定量PCR检测差异基因的表达

分别抽提正糖组、高糖组及记忆组的足细胞RNA，并行转录组测序。热图反映了差异表达基因及样本的垂直聚类结果，红色代表上调，绿色为下调(图3)。与正糖组相比，高糖组共有194个基因存在差异表达，其中119个上调，75个下调(图4A),记忆组共有532个基因存在差异表达，其中316个上调，216个下调(图4B)。因高糖记忆的分子本质系高糖诱导的细胞基因表达异常，在血糖正常后仍然持续存在，故对上述两组差异表达的基因进行再分析，发现108个基因(35个上调，73个下调)在高糖组及记忆组存在相似的表达规律，并将这些基因称为共有差异表达基因。图2 各组小鼠足细胞Nephrin蛋白(A)及α-SMA蛋白(B)的免疫荧光染色(×400)

各组小鼠足细胞Nephrin蛋白(A)及α-SMA蛋白(B)的免疫荧光染色(×400)

【参考文献】：
期刊论文
[1]地塞米松对内毒素诱导的小鼠葡萄膜炎的治疗效果及转录组分析（英文）[J]. 余鹏,邱一果,林茹,符馨予,郝冰涛,雷博.  南方医科大学学报. 2018(08)
[2]黏着斑信号通路调控肿瘤上皮间质转化的研究进展[J]. 吴艺舟,严雨欣,孙杰.  医学理论与实践. 2015(19)



本文编号：3240027