甘芍汤治疗多囊卵巢综合征模型大鼠的实验研究
发布时间：2017-05-22 12:00
本文关键词：甘芍汤治疗多囊卵巢综合征模型大鼠的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】：目的:本实验应用来曲唑建立多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型,造模成功后用甘芍汤剂对模型组大鼠进行干预,观察其对性激素水平、血糖、肝脏转氨酶及卵巢组织形态的影响,旨在通过动物实验的方法研究甘芍汤剂对多囊卵巢综合征的作用。方法:第一部分:选用70只42日龄SD清洁级有规律动情周期的雌性未孕大鼠,随机分为对照组(1%CMC1ml/100g·d,共21d)20只、模型组(来曲唑1mg/kgd,共21d)50只,模型组用来曲唑(1mg/kgd,共21d)灌胃来建立多囊卵巢综合征(PCOS)模型,每组大鼠每日行阴道涂片检测动情周期变化,来曲唑干预3周后,应用剪尾采血法取血1-2ml离心后取血清,应用全自动生化分析仪检测各组大鼠空腹血糖、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST);应用化学发光法测定各组大鼠的性激素水平;随机选取对照组与模型组各两只大鼠取双侧卵巢,于10%的甲醛液中固定24小时后行石蜡切片及染色,在光镜下观察卵巢组织的形态学改变。第二部分:选取造模成功的大鼠完全随机分为PCOS模型对照组(1%CMC1ml/100g·d,共21d)、西药组即达英-35(炔雌醇环丙孕酮)(0.2mg/kgd,共21d)组和中药组即甘芍汤剂组(20mg/kgd,共21d),每组15只,同期正常对照组(1%CMC1ml/100g·d,共21d)15只,各组相应药物干预3周后用剪尾采血法取血1-2ml离心,取血清,检测各组大鼠血清性激素水平、ALT、AST水平和空腹血糖;光镜下观察卵巢组织石蜡切片的改变。结果:1.自来曲唑建立PCOS大鼠模型第12天起,模型组大鼠阴道涂片在光镜下角化细胞少见,可见大量白细胞,提示模型组大鼠处于动情间期、无排卵即失去规律的动情周期;造模结束后检测各组大鼠血清性激素水平,模型组大鼠血清促黄体生成素(LH)为6.28±0.64m IU/ml、促卵泡生成素(FSH)为2.09±0.44m IU/ml、睾酮(T)为2.26±0.29ng/dl与对照组相比均有显著升高(P0.05),而模型组雌二醇(E2)水平为55.21±5.83pg/ml、孕酮(P)18.56±2.95ng/ml与对照组相比均有显著降低(P0.05),证实PCOS大鼠模型建立成功。2.中药、西药药物干预后,中药组(甘芍汤剂组)大鼠血清LH为3.91±0.47m IU/ml、睾酮T为1.32±0.27ng/dl、FSH水平为1.15±0.22m IU/ml各个指标与PCOS模型组比较下降明显(P0.05);西药组(达英-35组)大鼠血清LH为4.52±0.37m IU/ml、睾酮T为1.64±0.34ng/dl、FSH水平为1.15±0.22m IU/ml,与PCOS模型组比较下降明显(P0.05);与PCOS模型组比较:中药组血清E2为71.06±4.15pg/ml,P水平为28.46±1.91ng/ml明显升高(P0.05);西药组血清E2为67.01±2.87pg/ml、孕酮P水平为23.77±2.25ng/ml升高显著(P0.05);与西药组比较:中药组大鼠血清LH及T水平降低有明显差异(P0.05),血清E2、P水平升高有显著性差异(P0.05),FSH水平无显著性改变(P0.05)。3.卵巢组织形态学改变:与正常对照组比较:模型组大鼠卵巢包膜增厚、发白,表面可见多个泡状结构;镜下可见多数卵泡窦腔明显增大,囊性扩张,卵泡内卵母细胞及放射冠消失,颗粒细胞层数减少,可见少量黄体,多数未发育成熟的小卵泡,无成熟卵泡及排卵迹象;与模型对照组比较,甘芍汤剂组大鼠卵巢表面红润,白膜变薄;光镜下可见大量发育成熟的卵泡,卵泡膜细胞层不厚,颗粒细胞层增厚,囊状未成熟卵泡少见;达英-35组:卵巢外观红润;镜下可见成熟卵泡,部分卵泡结构清晰,多层颗粒细胞层形态完整,排列整齐,未见囊性卵泡,总的黄体和卵泡数量与PCOS模型组相比增多。4.血糖及转氨酶水平变化:与正常对照组比较:PCOS模型对照组血糖为5.91±0.68mmol/L水平升高(P0.05),肝脏转氨酶ALT为61.2±9.89U/L、AST水平为219.91±31.27U/L明显升高(P0.05);与模型对照组比较:中药组(甘芍汤剂组)大鼠血糖为4.90±1.06mmol/L,肝脏转氨酶ALT为65.93±5.48U/L、AST水平为195.091±18.11U/L明显升高(P0.05);与模型对照组比较:西药组(达英-35组)大鼠血糖为5.08±0.63mmol/L水平降低明显(P0.05),肝脏转氨酶ALT水平下降71.47±3.11U/L(P0.05),AST水平为239±14.23U/L两者比较无显著差异(P0.05);与西药组(达英-35组)比较,中药组(甘芍汤剂组)肝脏转氨酶水平降低有显著性(P0.05),两组血糖水平无明显差异(P0.05)。5.大鼠体重变化选择SD大鼠平均体重为160±2.5g,造模21天结束后对照组大鼠体重为180.33±2.58g,增长了17.87±3.81g模型组体重为195.4±4.64g,增长了32.91±5.19g。与对照组相比,模型组大鼠体重增加有明显差异(P0.05),模型组大鼠体重增长幅度较大,两者比较有明显差异(P0.05)。中西药药物干预后;正常对照组大鼠体重为208.67±3.04g,模型对照组大鼠体重为213.47±3.02g,中药组大鼠体重为208.53±3.18g西药组大鼠体重为206.6±3.74g;模型对照组与正常对照组比体重增加有显著性差异(P0.05),其余三组之间体重增加无明显改变(P0.05)。结论:1.实验结果证实,芳香化酶抑制剂来曲唑建立PCOS大鼠模型是一种可靠的、成功率高的、理想的建模方式;2甘芍汤可以使PCOS模型大鼠的血清性激素FSH、LH、T及血糖水平下降,可以促进卵泡发育成熟,改变卵巢组织的结构形态,这可能是其影响内分泌水平促进排卵的作用机制之一;3.甘芍汤剂组大鼠肝脏转氨酶水平与模型对照组、西药组(达英-35组)比较水平下降(P0.05),提示该汤剂不增加肝损伤,有保护大鼠肝脏的作用优势。
【关键词】：多囊卵巢综合征 动物模型 甘芍汤 来曲唑 达英-35
【学位授予单位】：山西中医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R271.9;R-332
【目录】：
- 中文摘要3-6
- Abstract6-10
- 英文缩略词表10-13
- 前言13-15
- 第一部分 PCOS动物模型的建立15-28
- 材料与方法15-21
- 1.实验动物15
- 2.主要药物与试剂15
- 3.主要仪器15-16
- 4.动物模型的建立及分组16-17
- 5.标本的采集与处理17-18
- 6.石蜡块的制备18
- 7.HE染色方法18-19
- 8.性激素的测定19-20
- 9.统计学方法20-21
- 结果21-26
- 讨论26-28
- 1.实验动物的选择26
- 2.PCOS造模方法的选择26-28
- 第二部分 甘芍汤对多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠的性激素水平及卵巢组织形态的影响28-41
- 材料与方法28-30
- 1.实验动物选择与分组28
- 2.主要试剂及仪器28
- 3.给药方式28
- 4.标本采集与处理28-29
- 5.性激素系列和血糖、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的测定29
- 6.石蜡块的制备、HE染色29
- 7.统计学方法29-30
- 结果30-35
- 讨论35-41
- 1.多囊卵巢综合征性激素水平的改变35-36
- 2.达英-35对PCOS的治疗作用36-37
- 3.甘芍汤剂对PCOS模型大鼠血清性激素水平及卵巢组织形态的影响37-40
- 4.甘芍汤对PCOS模型组大鼠肝功能的影响40-41
- 结论41-42
- 参考文献42-46
- 附录 中医药治疗多囊卵巢综合征新进展46-54
- 参考文献52-54
- 致谢54-55
- 作者简历55
【参考文献】
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本文编号：385604
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