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人睾丸组织TRIM69蛋白具有催化多聚泛素链形成的活性

发布时间:2017-09-28 13:07

  本文关键词:人睾丸组织TRIM69蛋白具有催化多聚泛素链形成的活性


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【摘要】:目的验证人源TRIM69蛋白是否具有催化多聚泛素链形成的活性。方法把人源TRIM69基因构建到原核细胞表达载体中,经过转化、诱导、表达和纯化获得TRIM69纯化蛋白,通过细胞外泛素化实验分析其是否具有催化多聚泛素链形成的活性;另外构建了TRIM69基因的全长、RING结构域的点突变、以及RING结构域截短序列的真核细胞表达载体,瞬时转染293T细胞或稳定表达泛素的HeLa细胞株,通过免疫沉淀结合免疫印迹方法检测其是否具有催化多聚泛素链形成的活性。结果泛素化分析实验表明TRIM69具有催化多聚泛素链形成的活性并且其活性依赖于它的RING结构域。结论成功鉴定了人源TRIM69蛋白具有催化多聚泛素链形成的活性,为进一步证明其是一个新的E3泛素连接酶提供依据。
【作者单位】: 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室;
【关键词】精子发生 E泛素连接酶 TRIM RING finger
【基金】:国家重大研究计划项目(2011CB944302)
【分类号】:R339.21
【正文快照】: 精子发生的每一个发育阶段,都伴有差异基因精确而有序地表达[1]。因此,深入了解与精子发生密切相关的差异表达基因,将有助于揭示生殖及进化的奥秘。研究表明,泛素化修饰在精子发生过程中发挥重要的作用,该修饰过程是通过多种酶级联反应实现的[2],其中E3泛素连接酶具有特异性

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9 张Z斍,

本文编号:935999


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