共培养环境中大鼠胚胎中脑细胞诱导人脐带间充质干细胞分化

发布时间：2017-09-30 09:34

  本文关键词：共培养环境中大鼠胚胎中脑细胞诱导人脐带间充质干细胞分化

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【摘要】：目的:检测人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)在与大鼠胚胎中脑细胞共培养环境中酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)和多巴胺转运蛋白(dopamine transporter,DAT)表达的变化。方法:(1)植块法分离培养hUCMSCs,以细胞免疫化学法鉴定其表面特异性标记物的表达;(2)无菌条件下分离E15大鼠胚胎中脑组织,制成单细胞悬液及中脑组织提取液;(3)用大鼠胚胎中脑组织提取液做培养液,将5-溴脱氧尿嘧啶核苷(bromodeoxyuridine,BrdU)标记的hUCMSCs与大鼠胚胎中脑细胞共培养14 d,细胞免疫化学法检测hUCMSCs中TH和DAT的表达。结果:HUCMSCs高表达CD29、CD44、CD73、CD90和CD105,极低表达CD31和CD45。在与大鼠胚胎中脑细胞共培养14 d后,hUCMSCs中TH阳性表达率为(18.06±2.29)%,DAT阳性表达率为(11.14±2.10)%。结论:用植块法可成功分离并体外培养hUCMSCs,其免疫表型符合间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的特征。在以大鼠胚胎中脑组织提取液作为培养液,并与大鼠胚胎中脑细胞共培养的诱导条件下,hUCMSCs可部分向多巴胺能神经元分化。
【作者单位】： 南通大学医学院人体解剖学系 江苏省神经再生重点实验室;
【关键词】： 人脐带间充质干细胞 胚胎中脑细胞 胚胎中脑组织提取液 共培养 多巴胺能神经元 分化 大鼠
【基金】：江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD) 南通市科技计划项目(K2010040,BK2012073)
【分类号】：R329
【正文快照】： 帕金森病(Parkinson’s disease,PD)的脑内移植研究已取得了较大进展,有许多PD患者接受了流产胎儿中脑组织的移植,移植组织中多巴胺能神经元能够长期存活,并不断释放多巴胺,使病人的症状得以明显改善[1,2]。但因胚脑移植物来源有限、异体免疫排斥及伦理等问题,胚脑组织移植在

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