HBV融合抗原真核表达载体pIRES-neo-HBAg的构建及表达

发布时间：2017-10-01 18:21

  本文关键词：HBV融合抗原真核表达载体pIRES-neo-HBAg的构建及表达

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【摘要】：目的构建HBV融合抗原真核表达质粒pIRES-neo-HBAg,并验证其在293T细胞中的表达。方法以含有HBV融合抗原的质粒pVAX1-HBV为模板,PCR扩增该融合基因。PCR产物经纯化后,将其克隆至载体pMD18-T中,构建pMD18-T-HBV质粒,经酶切和测序鉴定后,将其定向克隆入真核表达载体pIRES-neo,获得真核表达质粒pIRES-neo-HBAg。将该重组表达质粒瞬时转染人293T细胞,采用Western blot法、流式细胞术和免疫荧光细胞化学技术验证HBV融合抗原的表达。结果成功构建了HBV融合抗原真核表达质粒pIRES-neo-HBAg,Western blot法、流式细胞术和免疫荧光细胞化学技术结果显示融合抗原能够在293T细胞中表达。结论成功构建了HBV融合抗原真核表达质粒pIRES-neo-HBAg。
【作者单位】： 第四军医大学细胞工程研究中心;军事医学科学院基础医学研究所;
【关键词】： 乙型肝炎病毒 HBV融合抗原 真核表达 pIRES-neo T细胞
【基金】：国家自然科学基金(31100655)
【分类号】：R392.12
【正文快照】： 慢性乙型肝炎治疗性药物的研发取得了长足发展,但是却不能彻底消除肝细胞中乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)持续感染的主要元凶共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccD-NA),导致病毒反复反弹[1-3]。治疗性疫苗则能够通过激活细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 苏雯静;张野;刘博;连建奇;黄长形;白雪帆;;乙型肝炎疫苗联合B7-H1蛋白疫苗对HBV转基因小鼠抗HBsAg免疫应答的影响[J];细胞与分子免疫学杂志;2012年02期

【共引文献】

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 苏雯静;乙型肝炎疫苗联合B7-H1蛋白疫苗对HBV转基因小鼠抗HBsAg免疫应答的影响[D];第四军医大学;2012年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 刘博;苏文静;马力;张野;潘蕾;连建奇;黄长形;白雪帆;;B7-H1蛋白疫苗对HBV转基因小鼠HBsAg免疫效果影响的初步研究[J];细胞与分子免疫学杂志;2011年04期

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3 熊一力,贾彦征,王洪敏,刘光泽,任红,周智,张定凤;乙型肝炎病毒转基因小鼠用于研究治疗乙型肝炎药物初探[J];中华肝脏病杂志;2001年01期

【相似文献】

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4 孟忠吉;李磊;李新宇;张正茂;张振华;田拥军;王宝菊;张s，

本文编号：954948