单纯性脑震荡大鼠海马TNF-α的表达及AH6809干预的研究

发布时间：2017-10-28 05:14

  本文关键词：单纯性脑震荡大鼠海马TNF-α的表达及AH6809干预的研究

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【摘要】：目的：建立单纯性脑震荡(pure cerebral concussion, PCC)大鼠模型,观察PCC损伤后大鼠海马脑区TNF-α表达的变化规律及EP2受体抑制剂AH6809对其干预的影响,探讨PCC后TNF-α表达的病理学改变和AH6809的干预作用。 方法：在正常大鼠清醒状态下,采用自制“金属单摆闭合式脑损伤打击装置”制备PCC模型,损伤后随机分为3h、12h、1d、2d、3d和7d六组(n=5),另设正常对照组(n=5)。PCC损伤后给予AH6809干预,随机分为1d、2d、3d和7d四组(n=5),每个时间点另设PCC+生理盐水对照组(n=5)。采用免疫组织化学染色、Western Blotting和RT-PCR实验方法,观察PCC损伤后海马脑区不同时间点TNF-α的表达及其时序性变化规律,以及损伤后AH6809对其表达的影响。 结果：(一)PCC组 (1)免疫组化染色结果显示：正常生理状态下,海马脑区有少量TNF-a阳性表达。PCC损伤后3h、12h、Id、2d、3d各时间点海马脑区TNF-a的阳性表达和TNF-α阳性细胞计数均呈现出逐渐增强趋势,在3d组达高峰,7d组表达出现回落,但仍高于正常组,与正常对照组相比,差异有统计学意义(P0.05)。 (2)、Vestern Blotting与RT-PCR实验结果显示：TNF-α蛋白和mRNA在正常对照组表达均较弱,PCC损伤后表达呈现出逐渐增强趋势,与免疫组化结果相似,在3d组和7d组分别出现高峰和回落现象,、Vestern Blotting结果中的3h、12h、1d、2d、3d组,RT-PCR结果中的Id、2d、3d、7d组与正常对照组相比,差异有统计学意义(p0.05)。 (二)PCC+AH6809干预组 (1)免疫组化染色结果显示：AH6809干预组1d、2d、3d和7d组分别与生理盐水对照组相比,TNF-α的阳性表达和TNF-α的阳性细胞计数均出现下降,差异有统计学意义(P0.05)。 (2)Western Blotting实验结果显示：AH6809干预组1d、2d、3d和7d组分别与生理盐水对照组相比,TNF-α蛋白表达出现下降,差异有统计学意义(P0.05)； (3)RT-PCR实验结果显示：AH6809干预组1d、2d、3d和7d组分别与生理盐水对照组相比,TNF-αmRNA表达在1d组没有下降,仍高于生理盐水对照组,2d、3d、7d组表达出现下降,其中仅3d组差异有统计学意义(P0.05)。 结论：1、正常生理状态下,海马脑区有少量TNF-α表达。2、PCC损伤后TNF-α在海马脑区的表达出现一定时序性变化规律,证实TNF-α参与了PCC继发性病理过程。3、AH6809对TNF-α的表达有一定的干预抑制作用。
【关键词】：单纯性脑震荡 海马 TNF-α AH6809 大鼠
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R651.15
【目录】：

• 英文缩略词表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 引言10-13
• 材料和方法13-30
• 结果30-56
• 讨论56-66
• 结论66-67
• 参考文献67-72
• 综述72-82
• 参考文献79-82
• 在读期间发表论文目录82-83
• 致谢83

【参考文献】

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本文编号：1106796