谷氨酰胺对脓毒症小鼠氧化应激作用效果的研究

发布时间：2016-10-24 20:42

  本文关键词：谷氨酰胺对脓毒症小鼠氧化应激作用效果的研究，由笔耕文化传播整理发布。

《河北医科大学》 2015年

谷氨酰胺对脓毒症小鼠氧化应激作用效果的研究

刘翠华  

【摘要】：目的:探讨谷氨酰胺可否对脓毒症小鼠的氧化应激损伤起到减轻或者延缓,从而在危重症疾病氧化应激状态下发挥保护作用。方法:1动物分组与造模方法:96只昆明小鼠按完全随机方法分成4组,每组24只,分别设为空白组、模型组、谷氨酰胺低剂量组和谷氨酰胺高剂量组。空白组腹腔注射生理盐水,模型组和谷氨酰胺组腹腔注射内毒素制造脓毒症动物模型,注射计量为5mg/kg;造型成功后模型组尾静脉注射生理盐水,谷氨酰胺低剂量组1h后尾静脉注射0.75g/kg谷氨酰胺,高剂量组1h后注射1.5g/kg谷氨酰胺。分别在1h、6h、12h眼眶取血后处死小鼠,解剖分离动物肝,用液氮迅速冷冻,之后放入-80℃低温冰箱保存。2谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化酶歧化酶、丙二醛测定方法取4组小鼠血清、肝组织匀浆进行氧化应激指标超氧化酶歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathion peroxidase,GSH-Px)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)的测量。对样品测试前先将其从-80℃低温冰箱中取出,放入4℃冰箱中进行解冻。用冰冷的生理盐水对动物组织块进行漂洗,去除血液,用滤纸擦干,精确称重0.1g,置于匀浆管中,以重量(g):体积(ml)=1:9的比例加0.9ml生理盐水于匀浆管中,用眼科小剪在冰水浴条件下快速剪碎组织块。在冰水浴条件下手动匀浆组织块,30秒/次,间歇30秒,如此重复研磨6~8次,制成10%组织匀浆。用高速离心机2500~3000r/min将制备好的10%匀浆液离心15min,取上清液。取适量10%的匀浆液按体积比1:9稀释成1%的组织匀浆待测。为保证实验结果准确性,当天对匀浆液进行测定。3采用Excle2007进行数据录入,SPSS13.0进行数据统计描述与分析。计量资料的统计描述结果以(x_±s)表示,对4组数据进行正态性和方差齐性检验,如果各组数据满足正态性和方差齐性,则选择参数检验方法。两个独立样本的比较采用完全独立两样本比较的t检验,三个独立样本的比较采用单因素方差分析。如资料不服从正态性和方差齐性,采用多个独立样本比较的Kruskal-Wallis H非参数检验,进一步的两两比较采用Nemenyi法检验。检验水准α=0.05,P0.05,差异具有统计学意义。结果:1小鼠血清和肝脏SOD指标水平比较:1.1 SOD指标1小时时刻比较:1.1.1血清SOD指标比较:四组小鼠SOD水平相比,差异有统计学意义(P0.05)。进行两两比较,模型组血清SOD水平与空白组比较,差异有统计学意义(P0.05);模型组血清SOD水平与Gln低剂量组和Gln高剂量组相比,差异均无统计学意义(P0.05);Gln低剂量组血清SOD水平和Gln高剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05)。1.1.2肝脏SOD指标比较:四组小鼠肝脏SOD水平相比,差异有统计学意义(P0.05)。进行两两比较,模型组肝脏SOD水平与空白组比较,差异有统计学意义(P0.05);而模型组肝脏SOD水平与Gln低剂量组和Gln高剂量组比较,差异均无统计学意义(P0.05);Gln低剂量组肝脏SOD水平和Gln高剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05)。1.2 SOD指标6小时时刻比较:1.2.1血清SOD指标比较:四组小鼠血清SOD水平相比,差异有统计学意义(P0.05)。进行两两比较,模型组血清SOD水平与空白组、Gln低剂量组和Gln高剂量组比较,差异均有统计学意义(P0.05);空白组血清SOD水平与Gln低剂量组和Gln高剂量组比较,差异均有统计学意义(P0.05),Gln低剂量组血清SOD水平和Gln高剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05)。1.2.2肝脏SOD指标比较:四组小鼠肝脏SOD水平相比,差异有统计学意义(P0.05)。模型组肝脏SOD水平与空白组比较,差异有统计学意义(P0.05);模型组肝脏SOD水平与Gln低剂量组和Gln高剂量组相比,差异均有统计学意义(P0.05);Gln低剂量组肝脏SOD水平和Gln高剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05)。1.3 SOD指标12小时时刻比较:1.3.1血清SOD指标比较:四组小鼠血清SOD水平相比,差异有统计学意义(P0.05)。进行两两比较,模型组血清SOD水平与空白组、Gln低剂量组和Gln高剂量组相比,差异均有统计学意义(P0.05);Gln低剂量组血清SOD水平和Gln高剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05)。1.3.2肝脏SOD指标比较:四组小鼠肝脏SOD水平相比,差异有统计学意义(P0.05)。进行两两比较,模型组肝脏SOD水平与空白组、Gln低剂量组和Gln高剂量组相比,差异均有统计学意义(P0.05);Gln低剂量组肝脏SOD水平和Gln高剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05)。2小鼠血清和肝脏GSH-Px指标水平比较:2.1 GSH-Px指标1小时时刻比较:2.1.1血清GSH-Px指标比较:四组小鼠血清GSH-Px水平相比,差异有统计学意义(P0.05)。进行两两比较,模型组血清GSH-Px水平与空白组比较,差异有统计学意义(P0.05);模型组血清GSH-Px水平与Gln低剂量组和Gln高剂量组相比,差异均无统计学意义(P0.05);Gln低剂量组血清GSH-Px水平和Gln高剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05)。2.1.2肝脏GSH-Px指标比较:四组小鼠肝脏GSH-Px水平相比,差异有统计学意义(P0.05)。进行两两比较,模型组肝脏GSH-Px水平与空白组比较,差异有统计学意义(P0.05);而模型组肝脏GSH-Px水平与Gln低剂量组和Gln高剂量组比较,差异均无统计学意义(P0.05);Gln低剂量组肝脏GSH-Px水平和Gln高剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05)。2.2 GSH-Px指标6小时时刻比较:2.2.1血清GSH-Px指标比较:四组小鼠血清GSH-Px水平相比,差异有统计学意义(P0.05)。进行两两比较,模型组血清GSH-Px水平与空白组、Gln低剂量组和Gln高剂量组比较,差异均有统计学意义(P0.05);空白组血清GSH-Px水平与Gln低剂量组和Gln高剂量组比较,差异均有统计学意义(P0.05),Gln低剂量组血清GSH-Px水平和Gln高剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05)。2.2.2肝脏GSH-Px指标比较:四组小鼠肝脏GSH-Px水平相比,差异有统计学意义(P0.05)。模型组肝脏GSH-Px水平与空白组比较,差异有统计学意义(P0.05);空白组GSH-Px水平与Gln低剂量组和Gln高剂量组相比,差异均无统计学意义(P均0.05);Gln低剂量组肝脏GSH-Px水平和Gln高剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05)。2.3 GSH-Px指标12小时时刻比较:2.3.1血清GSH-Px指标比较:四组小鼠血清GSH-Px水平相比,差异有统计学意义(P0.05)。进行两两比较,模型组血清GSH-Px水平与空白组、Gln低剂量组和Gln高剂量组相比,差异均有统计学意义(P0.05);Gln低剂量组血清GSH-Px水平和Gln高剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05)。2.3.2肝脏GSH-Px指标比较:四组小鼠肝脏GSH-Px水平相比,差异有统计学意义(P0.05)。进行两两比较,模型组肝脏GSH-Px水平与空白组、Gln低剂量组和Gln高剂量组相比,差异均有统计学意义(P0.05);Gln低剂量组血清GSH-Px水平和Gln高剂量组比较,差异有统计学意义(P0.05)。3小鼠血清和肝脏MDA指标水平比较:3.1 MDA指标1小时时刻水平比较:3.1.1血清MDA指标比较:四组小鼠血清MDA水平相比,差异均有统计学意义(P0.05)。进行两两比较,模型组血清MDA水平与空白组比较,差异有统计学意义(P0.05);模型组血清MDA水平与Gln低剂量组和Gln高剂量组相比,差异均无统计学意义(P0.05);Gln低剂量组血清MDA水平和Gln高剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05)。3.1.2肝脏MDA指标比较:四组小鼠肝脏MDA水平相比,差异有统计学意义(P0.05)。进行两两比较,模型组肝脏MDA水平与空白组比较,差异有统计学意义(P0.05);而模型组肝脏MDA水平与Gln低剂量组和Gln高剂量组比较,差异均无统计学意义(P0.05);Gln低剂量组肝脏MDA水平和Gln高剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05)。3.2 MDA指标6小时时刻水平比较:3.2.1血清MDA指标比较:四组小鼠血清MDA水平相比,差异有统计学意义(P0.05)。进行两两比较,模型组血清MDA水平与空白组、Gln低剂量组和Gln高剂量组比较,差异均有统计学意义(P0.05);MDA水平差异均无统计学意义(P0.05);Gln低剂量组血清MDA水平和Gln高剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05)。3.2.2肝脏MDA指标比较:四组小鼠肝脏MDA水平相比,差异有统计学意义(P0.05)。模型组肝脏MDA水平与空白组比较,差异有统计学意义(P0.05);模型组肝脏MDA水平与Gln低剂量组和Gln高剂量组相比,差异均有统计学意义(P均0.05),Gln低剂量组肝脏MDA水平和Gln高剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05)。3.3 MDA指标12小时时刻水平比较:3.3.1血清MDA指标比较:四组小鼠血清MDA水平相比,差异有统计学意义(P0.05)。进行两两比较,模型组血清MDA水平与空白组、Gln低剂量组和Gln高剂量组相比,差异均有统计学意义(P均0.05);Gln低剂量组血清MDA水平和Gln高剂量组比较,差异无统计学意义(P均0.05)。3.3.2肝脏MDA指标比较:四组小鼠肝脏MDA水平相比,差异有统计学意义(P0.05)。进行两两比较,模型组肝脏MDA水平与空白组、Gln低剂量组和Gln高剂量组相比,差异均有统计学意义(P均0.05);Gln低剂量组血清MDA水平和Gln高剂量组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:脓毒症能够导致小鼠发生氧化损伤和氧化应激,而谷氨酰胺能够提高小鼠体内抗氧化酶SOD、GSH-Px的含量,提高其抗氧化能力。谷氨酰胺可使小鼠体内脂质代谢产物MDA的水平降低,从而降低有毒代谢产物水平,减轻氧化应激损伤,最终对机体起到保护作用。本研究发现Gln高剂量组和Gln低剂量组对小鼠发生氧化损伤的保护作用无差别。

【关键词】：
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R459.7
【目录】：

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