载脂蛋白E模拟肽对脓毒血症小鼠肝脏LPS代谢相关受体表达的调节作用

发布时间：2018-03-08 10:22

  本文选题：载脂蛋白E　切入点：模拟肽　出处：《复旦大学》2013年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：研究目的 1、观察载脂蛋白E(ApoE)模拟肽ApoE23对脓毒血症小鼠血浆LPS浓度变化的影响。 2、研究ApoE23对脓毒血症小鼠肝脏LPS代谢相关受体表达的调节作用。 研究方法 1、ApoE23合成采用固相合成法,高效液相色谱(HPLC)技术进行纯化；采用B组鼠伤寒沙门菌诱导脓毒血症C57BL小鼠模型；实验小鼠分三组：(1)感染对照组；(2)脓毒血症组；(3) ApoE23治疗组。 2、不同组小鼠血浆LPS(磷酸脂多糖)浓度测定采用连续透射免疫比浊法。 3、采用定量RT-PCR技术及Western-Blot技术检测不同组别小鼠肝脏中低密度脂蛋白受体(LDLR)、低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)、多配体蛋白聚糖-1(SDC1)、清道夫受体B1(SRB1)及ApoEmRNA及蛋白质表达水平的变化。 研究结果 1、脓毒血症组小鼠腹腔注射B组鼠伤寒沙门菌后1h血液细菌培养即分离到B组鼠伤寒沙门氏菌,小鼠肝脏病理切片表现为不同程度的炎性细胞浸润。血浆LPS浓度测定发现,细菌腹腔注射后1h,小鼠血浆中LPS浓度已开始升高,3h、24h维持在较高水平。ApoE23治疗后小鼠肝脏炎症病变明显减轻,血浆LPS浓度也明显低于脓毒血症组。 2、与感染对照组相比,脓毒血症组小鼠肝脏LDLR、LRP、SDC1在mRNA和蛋白质表达水平均有不同程度的降低,而SRB1变现为不同程度的升高；与脓毒血症组相比,ApoE23治疗后,肝脏LDLR在1、3、24h的mRNA和蛋白质表达水平均升高；LRP在mRNA表达水平没有改变,1h和3h蛋白质表达水平升高；SDC1与SRB1在1h的mRNA表达水平表现为一过性变化。 3、与感染对照组相比,脓毒血症组小鼠肝脏ApoE在1h、3h的mRNA和蛋白质水平表达下降；ApoE23治疗后,与脓毒血症组相比,ApoE在mRNA和蛋白质表达水平均没有明显改变。 结论 1、ApoE23能够明显改善脓毒血症小鼠肝脏组织炎症侵润,并明显降低脓毒血症小鼠血浆中LPS浓度,发挥抗脓毒血症效应。 2、脓毒血症时肝脏LPS代谢相关受体表达下降,导致LPS在肝脏中代谢障碍,上述病理生理变化加重血浆LPS浓度的升高。ApoE23治疗促进肝脏LDLR, LRP表达水平回升,加速LPS在肝脏中的代谢,发挥抗脓毒血症效应。 3、ApoE对脓毒血症的治疗作用目前仍存在争议,ApoE缺陷或是浓度过高均有可能诱发脓毒血症,所以脓毒血症时保持稳定的血浆ApoE水平将有利于脓毒血症的转归。由于ApoE主要在肝脏合成及代谢,药物ApoE23治疗之后我们发现肝脏ApoE的表达没有发生改变,外源性ApoE23不会对肝脏本身ApoE的合成代谢产生影响。
[Abstract]:Research purpose. 1. The effect of apolipoprotein (ApoE) mimic peptide ApoE23 on plasma LPS concentration in sepsis mice was observed. 2. To study the regulatory effect of ApoE23 on the expression of LPS metabolism-related receptors in the liver of sepsis mice. Research method. (1) the synthesis of ApoE23 was purified by high performance liquid chromatography (HPLC) and purified by solid phase synthesis, the sepsis C57BL mice model was induced by Salmonella typhimurium in group B, and the experimental mice were divided into three groups: control group (control group), control group (n = 2), sepsis group (n = 3) ApoE23 treatment group. 2. Plasma LPS (lipopolysaccharide) concentration in different groups was determined by continuous transmission immunoturbidimetry. 3. Quantitative RT-PCR and Western-Blot techniques were used to detect the expression levels of LDLRN, LRPX, SDC1, B1 SDC1, ApoEmRNA and protein in the liver of different groups of mice. Research results. 1. Salmonella typhimurium was isolated from the blood of mice in group B after intraperitoneal injection of Salmonella typhimurium in group B. the pathological sections of the liver of the mice showed inflammatory cell infiltration in varying degrees. The plasma LPS concentration was measured. 1 h after intraperitoneal injection of bacteria, the plasma LPS concentration in mice began to increase and maintained at a higher level for 24 h. After treatment with ApoE23, the inflammatory lesion of liver was significantly alleviated, and the plasma LPS concentration was significantly lower than that in sepsis group. 2. Compared with the infected control group, the expression of LDLRP-SDC1 in liver of sepsis group was decreased in different degree, but SRB1 was increased in different degree, and compared with that in sepsis group, the expression level of LDLRP-SDC1 in liver of sepsis group was higher than that of sepsis group, and the expression of LRP-SDC1 in liver of sepsis group was higher than that of sepsis group. The expression level of mRNA and protein in liver LDLR increased at 1h and 3h. The expression level of mRNA and protein in mRNA did not change at 1h and 3h. The mRNA expression of SDC1 and SRB1 at 1h showed a transient change. 3Compared with the infected control group, the expression of mRNA and protein in the liver of sepsis group decreased at 1h and 3h after treatment with ApoE23, but the expression level of mRNA and protein in the sepsis group was not significantly changed compared with that in the sepsis group. Conclusion. 1 ApoE23 could obviously improve the inflammation invasion of liver tissue in sepsis mice, decrease the concentration of LPS in plasma of sepsis mice, and play the role of anti-sepsis effect. 2. The expression of LPS metabolism-related receptors in the liver decreased during sepsis, which resulted in the dysfunction of LPS metabolism in the liver. The above pathophysiological changes aggravated the increase of plasma LPS concentration. ApoE23 treatment promoted the increase of liver LDLR, LRP expression, and accelerated the metabolism of LPS in the liver. Give play to the effect of antisepsis. (3) the therapeutic effect of ApoE on sepsis is still controversial. The deficiency of ApoE or the excessive concentration of ApoE may induce sepsis. Therefore, maintaining stable plasma ApoE levels during sepsis is conducive to the outcome of sepsis. Since ApoE is mainly synthesized and metabolized in the liver, we found that the expression of ApoE in the liver did not change after the treatment of the drug ApoE23. Exogenous ApoE23 has no effect on the synthesis and metabolism of ApoE in liver itself.
【学位授予单位】：复旦大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R459.7

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 罗泓,张绍英,胡波;35例脓毒血症临床分析[J];成都医药;2003年04期

2 王希锋,康焰,刘进;肛周脓肿切开引流术后脓毒血症死亡1例[J];实用医院临床杂志;2005年03期

3 詹芝娅;方向明;;巨噬细胞移动抑制因子与脓毒血症[J];中国医师杂志;2006年01期

4 马莉;卢雨蓓;薛莉花;杨兰;董晨明;;内皮组织在重度脓毒血症中的研究现状[J];中国急救医学;2006年01期

5 张晓婷;张建龙;马琪;;脓毒血症过程中大鼠皮层诱发电位的变化[J];新疆医科大学学报;2006年05期

6 彭晓东;陈骥;;脓毒血症患者血小板膜糖蛋白的变化及其意义[J];中国医师进修杂志;2006年25期

7 吴红红;高继玲;张建龙;王红梅;玛依努尔.伊明尔艾山;;脓毒血症过程肝脏结构和功能关系的研究[J];新疆医科大学学报;2006年12期

8 林伟平;李素珍;张秋芳;;高龄脓毒血症患者白细胞急剧下降一例的护理[J];解放军护理杂志;2008年17期

9 王丽霞;李凤云;;脓毒血症1例分析[J];中国误诊学杂志;2009年03期

10 杨纯;苏美仙;;脓毒血症患者免疫功能的改变与治疗对策[J];医学综述;2010年11期

相关会议论文 前10条

1 崔微艳;陆洁;邹静蓉;何玉峰;;63例重症脓毒血症的临床分析[A];“2008灾害创伤与急救新进展”学术交流会学术论文集[C];2008年

2 俞洪元;;尿脓毒血症[A];2012浙江省医学会男科学、泌尿外科学术年会论文汇编[C];2012年

3 霍智明;杨涛;朱银松;黄德榕;喻琨;;泌尿腔内手术后尿脓毒血症的防治[A];2013年贵州省泌尿外科学术会议论文汇编[C];2013年

4 崔微艳;陆洁;邹静蓉;何玉峰;;63例重症脓毒血症的临床分析[A];第六届全国中西医结合灾害医学学术会议学术论文集[C];2010年

5 蒋丽;;核因子-κB活化在大鼠脓毒血症胃肠黏膜屏障中的作用[A];中华医学会急诊分会第五届全国危重病学术交流会论文汇编[C];2004年

6 张召才;严静;胡才宝;张悦;蔡国龙;虞意华;;脓毒血症大鼠心肌整合素基因的表达变化[A];2006年浙江省危重病学学术年会论文汇编[C];2006年

7 陈江华;;脓毒血症与肾脏支持治疗[A];中华医学会肾脏病学分会2006年学术年会专题讲座[C];2006年

8 胡静;陆国平;陆铸今;卢亚芳;贺骏;张灵恩;;新生儿脓毒血症血液净化的护理[A];中华医学会第十四次全国儿科学术会议论文汇编[C];2006年

9 古秀雯;毛恩强;刘伟;汤耀卿;张圣道;;脓毒血症血管内皮功能的细胞标记物研究[A];中国病理生理学会危重病医学专业委员会第八届全国大会暨中华呼吸病学会呼吸生理和重症监护学组年会论文集[C];2008年

10 崔微艳;陆洁;邹静蓉;何玉峰;;63例重症脓毒血症的临床分析[A];中华医学会急诊医学分会第十三次全国急诊医学学术年会大会论文集[C];2010年

相关重要报纸文章 前4条

1 本报记者 东辰;礼来脓毒血症新药获准欧洲上市[N];中国高新技术产业导报;2002年

2 紫箕;礼来遭遇“Xigris门”[N];医药经济报;2006年

3 力信 小涛;生物工程点石成金 人体蛋白也成良药[N];医药经济报;2002年

4 李楠;早期复苏可降低脓毒血症死亡率[N];健康报;2006年

相关博士学位论文 前7条

1 刘骏峰;内皮细胞生物反应器在猪脓毒血症伴多脏器功能障碍综合征中的应用[D];复旦大学;2008年

2 谢俊然;羟乙基淀粉130/0.4对脓毒血症大鼠全身抗炎作用及相关机制研究[D];浙江大学;2010年

3 杨毅;汉族人群线粒体基因单倍型类群与重度脓毒血症发病和预后的相关性研究[D];浙江大学;2008年

4 唐e，

本文编号：1583500