丙酮酸乙酯对脓毒症凝血功能紊乱的保护作用及其机制研究

发布时间：2018-03-19 03:00

  本文选题：血小板　切入点：脓毒症　出处：《第二军医大学》2013年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的 1.利用脓毒症的经典盲肠结扎穿孔术(cecal ligation puncture，CLP)探讨丙酮酸乙酯（ethyl pyruvate EP）对于脓毒症凝血功能紊乱中的保护作用。 2.动态观察CLP模型小鼠血液中高迁移率族蛋白Bl(high mobility group boxlportein，HMGBl)的含量变化及小鼠肺组织蛋白表达水平，探讨丙酮酸乙酯（ethylpyruvate EP）对脓毒症凝血功能紊乱中的作用机制，为临床脓毒症器官功能保护提供新的理论研究依据。 方法 将选择的SPF级昆明（KM）雄性小鼠共135只随机分为假手术组（sham组）、手术组（CLP组）、治疗组（EP组），每组45只，然后观察小鼠术后各时间点反应、个体活动、睡眠、进食、呕吐、眼球凹陷、呼吸，分泌物、竖毛、腹泻、粪便、尿量等生存情况，应用夹心酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测技术术后即刻、4小时、8小时、12小时、24小时、48小时、72小时总共7个时间点的外周血中肌酐（Cr）指标、血小板(PLT)计数指标、凝血酶原时间(PT)指标、谷丙转氨酶（ALT）指标、活化部分凝血酶时间(APTT)指标、纤维蛋白原(FIB)指标、高迁移率族蛋白Bl（HMGB1）指标、D-二聚体指标、蛋白C（PC）指标，在活杀前进行脓毒症评分，并观察脓毒症小鼠严重程度的评分、生存的时间，应用Western blot法检测肺组织中高迁移率族蛋白Bl（HMGB1）的表达水平，随后进行肺组织病理切片HE后观察结果。 结果 1.观察术后72h小鼠假手术组（sham组）存活率均为100%，丙酮酸乙酯治疗组（EP组）存活率约为60%，手术组（CLP组）存活率约为10%（其P0.05）。与假手术组（sham组）相比，丙酮酸乙酯治疗组（EP组）和手术组（CLP组）的小鼠在8小时后血小板(PLT)逐渐下降，但丙酮酸乙酯治疗组（EP组）显著高于同时间点手术组（CLP组）（P0.05）；与假手术组（sham组）相比活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)延长，但丙酮酸乙酯治疗组（EP组）较手术组（CLP组）明显延长时间较短（其P0.05）；与假手术组（sham组）相比谷丙转氨酶（ALT）、肌酐（Cr）明显升高，但丙酮酸乙酯治疗组（EP组）显著低于同时间点手术组（CLP组）（其P0.05）。光镜下手术组（CLP组）、丙酮酸乙酯治疗组（EP组）肺组织可见明显急性肺损伤改变表现：水肿、充血、炎症细胞浸润、间质变窄、大小不同程度形成微血栓，丙酮酸乙酯治疗组（EP组）较手术组（CLP组）病理损伤明显减轻，且肺组织损伤病理的评分明显降低(其P0.05)。 2.丙酮酸乙酯治疗组（EP组）和手术组（CLP组）观察8小时后纤维蛋白原(FIB)明显下降，，到24小时时达到峰值，但EP组显著高于同时间点CLP组（其P0.05）。EP组和CLP组观察8小时后D-Dimer明显升高，到12小时时达到峰值，随后逐渐降低，但丙酮酸乙酯治疗组显著低于同时间点手术组（其P0.05）。CLP组术后12小时血清PC开始明显升高，48小时达到峰值并持续至72小时，而EP组在12小时PC明显升高，且显著高于同时间点手术组（其P0.05）。CLP组在血清中发现HMGB1在观察8小时后显著升高，12小时出现峰值，随后开始降低，效应可持续超过72小时，但EP组显著低于同时间点CLP组（P0.05）。sham组不同时间点小鼠HMGBl蛋白均有微量表达，而CLP组、EP组HMGBl蛋白从8小时开始表达明显增多，以12~24小时为显著，48小时开始下降但仍高于假手术组，丙酮酸乙酯治疗组同时间点蛋白水平显著低于手术组(其P0.05)，但仍高于假手术组且有显著性差异(其P0.05)。 结论 1. EP能够显著减轻CLP诱导的脓毒症凝血功能障碍程度，提高脓毒症凝血功能紊乱小鼠的生存率。 2.EP能够显著抑制脓毒症小鼠HMGBl水平，通过抑制HMGBl来调节纤溶和凝血系统从而有效减轻CLP诱导的脓毒症凝血功能紊乱。
[Abstract]:objective
1. to explore the protective effect of ethyl pyruvate EP on sepsis coagulation function disorder by cecal ligation puncture (CLP).
2. dynamic observation of high mobility group protein Bl in mouse model of blood CLP (high mobility group boxlportein, HMGBl) expression in lung tissue of mice and to explore the changes of protein content, ethyl pyruvate (ethylpyruvate EP) on the mechanism of sepsis coagulation disorders, and provide new theoretical basis for the clinical study of sepsis with organ the function of protection.
Method
灏嗛

本文编号：1632497