高压电烧伤大鼠血清GSSG、GR的变化及乌司他丁的干预作用

发布时间：2018-03-26 15:00

本文选题：高压电　切入点：烧伤　出处：《河北医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的:高压电烧伤是一种特殊原因所致的损伤,烧伤后体内氧自由基产生增多和(或)机体抗氧化能力下降所引起的脂质过氧化、蛋白氧化、DNA损伤而造成严重的细胞、组织、器官损害,血清中谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量变化是减轻机体氧化应激损伤的关键因素之一。在还原反应中,谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPx)通过将GSH作为电子供体使H2O2解毒,并生成终产物氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)。谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase,GR)是将GSSG还原为GSH的催化酶。因此,我们设计本实验,旨在研究高压电烧伤早期大鼠血清GSSG、GR变化,并通过乌司他丁(ulinastatin,UTI)进行干预,研究烧伤后GSSG、GR的变化机制,探讨UTI治疗高压电烧伤的可行性。方法:1实验动物分组:健康成年SD大鼠(由河北医科大学动物实验中心提供,体重291~362g,动物许可证号:SCXK(冀)2013-1-003,合格证编号832457)240只,按随机数字表法分成四组,假高压电烧伤组(简称:假伤组)、高压电烧伤组(简称:电伤组)、高压电烧伤UTI治疗组(简称:UTI组)、高压电烧伤盐水治疗组(简称:盐水组),每组各60只。每组又按观察时间分为电击前15min、电击后5min、电击后1h、2h、4h、8h六个时相组,每时相组10只。2实验前准备:将大鼠编号、称重,左上肢、右下肢及前胸脱毛。将实验药品按实验需要配成所需浓度。3高压电烧伤模型制作:首先连接好实验变压器和调压器电线。用10%水合氯醛溶液腹腔注射麻醉大鼠,按40mg/kg给药,麻醉成功后,将大鼠仰卧于专用电击实验台上,固定四肢,将两个1cm×1cm电极片分别固定于大鼠的左上肢(电流入口)、右下肢(电流出口)脱毛区。接通电源后,调整调压器使升压器输出电压至2k V,连接升压器,使高压电流通过大鼠,电击3s。对照组制作假电伤模型,不合闸通过电流,其余步骤与电伤组一致。电击5min内,UTI组腹腔注射2×104U/kg UTI,盐水组腹腔内注射等量的生理盐水。4样本采集与保存:将高压电烧伤模型复制成功的大鼠开胸暴露心脏,直视下心脏抽血6ml,置于一次性使用真空采血管(红)中,轻轻颠倒数次后静置30min,上离心机,以3000转/min离心10min,红管中取上清液置于Eppendorf管中在-70℃条件下保存。5指标检测:置于冰箱的血清采用ELISA双夹心抗体法,检测GSSG、GR含量。6数据处理:采用SPSS 21.0统计软件,行两因素析因设计的方差分析。以P0.05为显著性检验水准。结果:1大鼠血清GSSG含量变化电伤组GSSG含量与假伤组相比明显升高(P0.05),且GSSG含量电伤后在一定时间内有显著差异(P0.05),呈上升趋势。UTI组GSSG含量总体低于盐水组(P0.05),且GSSG含量治疗后在一定时间内有显著差异(P0.05),伤后5min、1h、2h、4h、8h与伤前相比有较明显明显差异(P0.05)2大鼠血清GR含量变化电伤组GR含量总体高于假伤组(P0.05),且GR含量受伤后随时间有显著差异(P0.05),呈增高趋势。UTI组GR含量总体低于盐水组(P0.05),且GR含量治疗后随时间有显著差异(P0.05),UTI组伤后5min~8h各时相均高于本组伤前值(P0.05)结论:1高压电烧伤早期大鼠血清GSSG、GR含量均有不同程度升高,证明烧伤后存在的GSH大量消耗生成GSSG,同时GR含量升高还原GSSG为GSH以补充机体所需。2高压电烧伤UTI组GSSG、GR含量较盐水组降低,提示UTI治疗具有抗氧化作用,能减少GSH转化为GSSG,同时降低了GR的活性,减轻机体氧化应激损伤。
[Abstract]:Objective : High - voltage burn is a kind of injury caused by special causes . The changes of lipid peroxidation , protein oxidation and DNA damage caused by the increase of oxygen free radicals in the body and the decrease of antioxidant ability of the organism are one of the key factors to alleviate the oxidative stress injury . In the reduction reaction , glutathione peroxidase ( GPx ) is used as electron donor to detoxicate H _ 2O _ 2 , and the final product oxidized glutathione ( oxidized glutathione ) is produced . Methods : We designed this experiment to study the changes of Gssg and GR in rats with high piezoelectric burn . It was divided into four groups according to the random number table method . The rats were divided into four groups according to the random number table method . The rats were divided into four groups according to the random number table method . The results showed that the content of GR in UTI group was significantly higher than that in saline group ( P0.05 ) . The content of GR in UTI group was significantly higher than that in saline group ( P0.05 ) . and the activity of GR is reduced , and the oxidative stress injury of the organism is reduced .

【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R647

【参考文献】