Wnt3a在大鼠蛛网膜下腔出血的早期脑损伤中影响神经发生的实验研究

发布时间：2018-04-01 02:09

  本文选题：神经发生　切入点：蛛网膜下腔出血　出处：《山东大学》2014年硕士论文

【摘要】：研究目的： 本研究通过观察实验大鼠中枢神经系统中海马组织的神经发生情况,并进一步检测Wnt信号通路分子散乱蛋白-1和p-连环蛋白的表达,探讨在蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中Wnt3a能否发挥促进神经发生的作用以及可能的机制。 研究方法： 选择清洁健康的雄性SD大鼠共70只,将大鼠随机分为假手术组(Sham组)、蛛网膜下腔出血组(SAH组)、干预剂Wnt3a Ⅰ组(Wnt3a Ⅰ组)、干预剂Wnt3aⅡ组(Wnt3aⅡ组)、干预剂Wnt3aⅢ组(Wnt3aⅢ组)、干预剂Wnt3aⅣ组(Wnt3aⅣ组)和拮抗剂DKK-1组(DKK-1组)。采用从枕大池注入自体动脉血法建立蛛网膜下腔出血实验模型。术后对实验大鼠进行BrdU标记,每次以50mg/kg BrdU的剂量腹腔注射,总共4次,每次间隔2h。干预剂Wnt3a与DKK-1均在SAH模型制备前6h从枕大池注入,无需给予干预剂的实验组以等量生理盐水代替。通过免疫荧光技术在大鼠海马组织的齿状回区域选择5个视野区,计算视野中的阳性细胞数和总细胞数以得出阳性细胞百分率,以5个区域阳性细胞百分率的均值作为评估神经干细胞(neural stem cells, NSCs)增殖程度的指标。通过蛋白印迹法观察实验大鼠海马组织中Wnt通路信号分子β-连环蛋白和散乱蛋白-1的表达水平。 结果： 随着干预剂Wnt3a剂量的增加,各组大鼠海马组织中的BrdU阳性细胞百分率呈升高的趋势(P0.05),各组中的通路信号分子散乱蛋白-1与p-连环蛋白的表达水平也呈逐渐增高的趋势(P0.05)；而在应用抑制Wnt通路的干预剂DKK-1后,大鼠海马组织中散乱蛋白-1与β-连环蛋白的表达水平明显降低,而海马组织的BrdU阳性细胞百分率也显著下降(P0.05)。我们发现,作为评估神经干细胞增殖程度的BrdU阳性细胞百分率,在应用干预剂Wnt3a后呈浓度依赖性增强,而在给予经典Wnt通路抑制剂DKK-1后却呈明显降低的趋势,说明Wnt3a在大鼠蛛网膜下腔出血后的早期脑损伤中可以发挥促进神经发生的作用；而作为重要Wnt通路信号分子的散乱蛋白-1与p-连环蛋白也都随干预剂Wnt3a的应用程浓度依赖性增强,随抑制剂DKK-1的应用呈显著下降的趋势,说明Wnt3a可能通过经典Wnt信号通路促进了神经发生。 结论： 在蛛网膜下腔出血后的早期脑损伤中Wnt3a可能通过经典Wnt信号通路促进神经发生,对中枢神经系统的修复与保护发挥积极作用。
[Abstract]:Purpose of study :

In this study , we observed the neurogenesis of hippocampus in the central nervous system of experimental rats , and further examined the expression of Wnt3a and p - catenin in the Wnt signaling pathway , and discussed whether Wnt3a could play a role in promoting neurogenesis and the possible mechanism in the early brain injury following subarachnoid hemorrhage .

Study method :

The rats were randomly divided into sham operation group ( Sham group ) , subarachnoid hemorrhage group ( SAH group ) , intervenient group Wnt3a group 鈪，

本文编号：1693482