高迁移率族蛋白B1在烧伤创面早期进展中作用的实验研究

发布时间：2018-05-17 00:02

本文选题：烧伤进展 + 淤血带　；参考：《西南医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的:观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在烧伤创面早期进展中的作用,并探讨其可能机制。方法:使用事先已准备好的黄铜梳模具(四排矩形柱头及三个间隔)制作烫伤模型,既被三个间隙(5×20mm)分割的四个矩形(10×20mm)烫伤创面,其中这三个间隙代表着淤血(或缺血)带。随机将24只SPrague-Dawley(SD)大鼠分为对照组、HMGB1干预组、BoxA(HMGB1拮抗剂)拮抗组,造模后立即将PBS、HMGB1、BoxA分别皮下注射到相应烫伤创面的淤血带中。于烫伤后1、12、24、72h时间点肉眼观察创面情况,拍照记录,并取材(淤血带)进行相关指标检测:(1)肉眼观察烫伤创面淤血带坏死区域变化,并使用软件计算坏死面积的百分比。(2)HE、masson染色下观察烧伤早期淤血带组织的病理学变化,观察不同时间点各组淤血带组织坏死情况。(3)通过免疫组化、Western blot技术检测缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、CD45因子的表达情况。结果:(1)肉眼观察发现随着时间的发展,各组创面淤血带坏死面积逐渐增加,但与对照组相比,HMGB1治疗组淤血带坏死面积相对较小,而BoxA拮抗组坏死面积相对较大。在烫伤后24h及72h,HMGB1治疗组、对照组、拮抗组淤血带进展为坏死的面积百分比分别为18+10%、34+8%、47+10%(HMGB1组vs对照组,P0.05;BoxA组vs对照组,P0.05;HMGB1组vs BoxA组,P0.05)和36+12%、59+6%、68+15%(HMGB1组vs对照组,P0.05;BoxA组vs对照组,P0.05;HMGB1组vs BoxA组,P0.05)。(2)在HE、masson染色镜下显示:烫伤后,随着时间的发展,两坏死带残存的上皮组织越来越少,淤血带间隔越来越窄,逐渐趋向于合并。与对照组相比,HMGB1治疗组保持着相对缓慢的坏死速度,其中拮抗组最差。经过进一步测量,在烫伤后24h和72h,HMGB1组、对照组、拮抗组淤血带残存上皮间隔分别为3.10+0.25mm、2.74+0.27mm、2.35+0.30mm(HMGB1组vs对照组,P0.05;BoxA组vs对照组,P0.05;HMGB1组vs BoxA组,P0.05)和2.62+0.33mm、1.84+0.63mm、1.56+0.66mm(HMGB1组vs对照组,P0.05;BoxA组vs对照组,P0.05;HMGB1组vs BoxA组,P0.05)。同时我们还可以发现HMGB1治疗组淤血带胶原变性范围相对较窄,残留毛囊、汗腺增多,血管栓塞减轻。(3)各时间点HMGB1组与对照组相比,淤血带中HIF-1α因子的表达明显增强;拮抗组HIF-1α因子的表达水平,则表现出降低的趋势。同时参照对照组,应用HMGB1治疗可在多个时间点促进淤血带中CD45蛋白和CD45阳性细胞的表达,抑制HMGB1作用则同时也明显抑制了淤血带中CD45蛋白和CD45阳性细胞的表达。结论:(1)HMGB1可在烧伤早期改善创面淤血带组织的病理学形态,降低坏死组织面积,延缓烧伤早期进展。(2)HMGB1能促进烧伤创面淤血带中HIF-1α因子的表达,抑制HMGB1的作用也同时降低了HIF-1α因子的表达。HMGB1很可能是通过HMGB1-HIF-1α通路来延缓烧伤进展的。(3)在应用HMGB1治疗的过程中,还能促进淤血带中CD45因子的表达,促进烧伤早期创面的炎症应答作用。拮抗HMGB1的作用,也同时抑制了CD45因子的表达。但增强的炎症反应并没有加重烧伤创面的进一步坏死,反而延缓了烧伤进展。这很可能与烧伤早期适当的促进炎症反应,反而能起到促进创面修复作用有关。
[Abstract]:Objective : To observe the role of high mobility group protein ( BH1 ) in the early progression of burn wound , and to explore its possible mechanism . Methods : Four rectangular ( 10 脳 20mm ) scald wounds were prepared by using the previously prepared brass comb mould ( four rows of rectangular cylinder heads and three intervals ) . ( 3 ) The expression of hypoxia inducible factor 1伪 ( HIF - 1伪 ) and CD4factor was detected by immunohistochemistry and Western blot . Results : ( 1 ) The area of necrosis was increased gradually with time . Compared with the control group , the area of necrosis was 18 + 10 % , 34 + 8 % , 47 + 10 % ( P0.05 ) , 59 + 6 % , 68 + 15 % ( P0.05 ) . ( 2 ) In the HE and masson stain , with the development of time , there were fewer and fewer epithelial tissue remaining in the two necrotic bands , and the interval between the two necrotic bands was more and more narrow , and gradually tended to merge . Compared with the control group , the interval between the two groups was 3.10 + 0.25 mm , 2.74 + 0.27 mm , 2.35 + 0.30 mm ( P0.05 ) . Conclusion : ( 1 ) In the treatment of burn wound , the expression of HIF - 1伪 in the blood - stasis zone can be improved .
【学位授予单位】：西南医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R644

【参考文献】