支架蛋白Gab2调控中性粒细胞迁移以及急性肺损伤的作用机制研究

发布时间：2018-06-05 09:12

本文选题：Gab2 + 急性肺损伤　；参考：《浙江大学》2017年硕士论文

【摘要】：急性肺损伤(acutelunginjury,ALI)是由多种因素导致的肺泡上皮细胞和毛细血管内皮细胞损伤,造成的弥漫性肺间质和肺水肿,导致急性低氧性呼吸功能障碍的一类疾病。ALI通常发生于急性重症患者,同时伴有全身系统性炎症,其主要病理特征为快速的肺泡损伤和肺部炎症导致大量细胞因子的产生,进而招募中性粒细胞(polymorphonuclear,PMN)以及血管渗漏导致肺水肿。尽管对ALI及治疗策略已有大量研究,但对其病理机制仍不清楚。PMN作为血液中含量最多的白细胞,处在机体抵御微生物病原体感染的第一线,在固有免疫系统与炎症反应中扮演着重要的角色。PMN有效的骨髓动员及从血液中迁移到间质组织和炎症部位对于病原体的清除是必不可少的。PMN外渗到组织发挥作用是一个较为复杂的过程,其中涉及到PMN的功能,如极化、黏附、迁移、活性氧的释放及吞噬等。然而,PMN在组织的异常积累与活化会释放过量的强氧化物及蛋白酶等多种物质导致组织损伤,当肺部受到异常的PMN活化攻击时,将会导致ALI。接头蛋白或支架蛋白是一类能与蛋白激酶和磷酸酶结合的蛋白,可以介导蛋白与蛋白之间的相互作用,并且促进蛋白复合物的形成,参与多条信号通路的激活。Gab2支架蛋白广泛表达于机体的各种组织,在人类癌症,特别是白血病、乳腺癌、卵巢癌及黑色素瘤的发生、发展中扮演着重要的角色。前期研究发现分化的THP-1细胞,又称为中性粒样细胞,其活性氧的生成依赖于支架蛋白Gab2。这提示我们Gab2对于PMN的活性氧生成具有一定的作用,而激活的PMN可释放多种活性氧物质,这些物质可以通过直接或间接作用造成肺组织的广泛损伤。而已有研究报道Gab2也可参与细胞增殖、生存、迁移、分化、凋亡等过程,但关于Gab2在ALI中的调控机制并未有研究,因此我们想探究Gab2在ALI中的作用。本项研究采用Gab2敲除小鼠,在正常情况下敲除组小鼠与对照组在肺组织结构没有明显差异,已有文献表明Gab2的缺失也不会影响血液中各类细胞的数目。其次,我们采用磁珠分选的方法从小鼠骨髓中提纯出PMN,检测发现Gab2敲除不会影响PMN的分化及细胞形态。我们进一步检测了 PMN的相关功能,如迁移、黏附、活性氧产生、吞噬等,结果表明Gab2的缺失会抑制PMN的活性氧产生及迁移功能,而不影响黏附、吞噬功能。我们进一步利用LPS构建小鼠ALI模型,与对照组相比,Gab2敲除组显示ALI加重,这与前期Gab2缺失抑制PMN迁移的结果不吻合,因为PMN趋化到肺部是较为复杂的过程,其中包括穿过血管内皮细胞等,而我们所用为全身敲除Gab2基因修饰小鼠,因此我们进行骨髓置换实验后再构建ALI模型,结果发现Gab2缺失可以缓解ALI。基于以上实验结果我们发现Gab2主要影响PMN的活性氧生成和迁移功能,而Gab2的缺失可以缓解LPS诱导的ALI。已有文献报道NADPH氧化酶依赖的活性氧能够调控PMN的迁移,Gab2可能通过影响PMN活性氧的生成参与其迁移进而调控ALI。进一步研究Gab2在ALI中的作用,有助于更好的理解ALI的病理过程同时也为诊断治疗此类疾病提供新的靶点。
[Abstract]:Acute lung injury ( ALI ) plays an important role in the pathogenesis of acute hypoxic respiratory dysfunction . The results showed that the deletion of Gab2 could inhibit the production and migration of PMN , and the deletion of Gab2 could alleviate the ALI . Based on the above experimental results , we found that Gab2 mainly influenced the activation oxygen generation and migration function of PMN , and the deletion of Gab2 could alleviate ALI .
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R563.8

【参考文献】