辛伐他汀纳米粒对脂多糖刺激的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

发布时间：2018-06-10 14:18

  本文选题：辛伐他汀 + 纳米粒　； 参考：《浙江大学》2013年硕士论文

【摘要】：目的： 初步尝试辛伐他汀纳米粒的制备,研究其理化性质,并探讨其对脂多糖(Lipopolysaccharides, LPS)刺激的体外培养的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响。 方法： (1)采用溶剂扩散法方法制备辛伐他汀纳米粒,粒度与Zeta电位分析仪测定纳米粒粒径,以高效液相色谱法测定药物包封率和载药量。(2)采用胰酶消化法进行人脐静脉内皮细胞的培养,以免疫组化法对内皮细胞进行鉴定。(3)通过LPS刺激脐静脉内皮细胞制造脓毒症细胞模型,分为空白对照组,LPS组,辛伐他汀静脉制剂组(LPS+辛伐他汀静脉制剂)及辛伐他汀纳米粒组(LPS+辛伐他汀纳米粒),培养6h,12h,24h,予MTT法检测细胞活性。共培养12h后流式细胞仪检测细胞调亡率,并用蛋白印迹法(western blot)检测四组Bcl-2及Bax蛋白的表达。 结果： (1)采用溶剂扩散法成功制备辛伐他汀纳米粒,测其直径在350.3±156.9nm,包封率65.71%,载药量3.29%。(2)原代脐静脉内皮细胞梭形,连接呈片后显现内皮细胞形状,呈铺路石样。人脐静脉内皮细胞Ⅷ因子相关抗原抗体鉴定为内皮细胞。(3)细胞活性比较：共培养6h后LPS组的细胞活性明显低于空白对照组(P0.05),辛伐他汀静脉制剂组及辛伐他汀纳米粒组细胞活性均高于LPS组(P0.05),辛伐他汀纳米粒组细胞活和辛伐他汀静脉制剂组活性无明显差别(P0.05)。共培养12h及24h细胞活性比较：LPS组的细胞活性明显低于空白对照组(P0.05),辛伐他汀静脉制剂组及辛伐他汀纳米粒组细胞活性均高于LPS组(P0.05),辛伐他汀纳米粒组细胞活性高于辛伐他汀静脉制剂组(P0.05)。12h和24h组间活性无明显差异。共培养12h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率结果：LPS组的凋亡率明显高于空白对照组(P0.05),辛伐他汀静脉制剂组凋亡率及辛伐他汀纳米粒组均低于LPS组(P0.05),辛伐他汀纳米粒组凋亡率低于辛伐他汀静脉制剂组(P0.05). Western Blot检测各组Bc1-2, Bax蛋白结果：LPS组Bcl-2蛋白的表达低于空白对照组(P0.05),Bax蛋白的表达明显高于空白对照组(P0.05)。辛伐他汀静脉制剂组及辛伐他汀纳米粒组Bcl-2蛋白的表达均高于LPS组(P0.05),低于空白对照组((P0.05), Bax蛋白的表达明显低于LPS组(P0.05),高于空白对照组(P0.05)。辛伐他汀纳米粒组Bcl-2蛋白的表达高于辛伐他汀静脉制剂组(P0.05), Bax蛋白的表达低于辛伐他汀静脉制剂组(P0.05)。 结论： (1)采用溶剂扩散法方法制备的辛伐他汀纳米粒粒径小,包封率及载药量较好；(2)LPS可能通过降低Bcl-2蛋白表达,提高Bax蛋白表达而明显增加人脐静脉内皮细胞凋亡率；(3)辛伐他汀静脉制剂及辛伐他汀纳米粒能提高LPS刺激人脐静脉内皮细胞的活性,降低其细胞凋亡率,其可能机制为提高LPS刺激人脐静脉内皮细胞Bcl-2蛋白的表达,而降低Bax蛋白的表达,起到保护内皮细胞的作用；(4)辛伐他汀纳米粒组较辛伐他汀静脉制剂细胞活性更强,凋亡率更低,可能与辛伐他汀纳米粒组Bcl-2蛋白表达高于辛伐他汀组,而Bax蛋白表达低于辛伐他汀组有关。
[Abstract]:Objective:
A preliminary attempt was made to prepare simvastatin nanoparticles, to study their physical and chemical properties, and to explore the effect of Lipopolysaccharides (LPS) on the apoptosis of human umbilical vein endothelial cells cultured in vitro.
Method锛，

本文编号：2003514