过氧化物酶体增殖物激活受体β在老龄脓毒血症大鼠肺部炎症中的作用

发布时间：2019-11-22 14:34

【摘要】：目的探讨激活过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)-β对老龄脓毒血症大鼠模型肺部炎症、炎症指标及死亡率的影响。方法选用24月龄雄性SD大鼠,通过盲肠结扎穿孔(CLP)手术建立脓毒血症模型,予GW501516 0.25、0.75 mg/kg为低、高剂量组。分别液体复苏CLP术后大鼠,与空白对照组、单纯CLP手术组比较24、48 h死亡率,运用HE染色、免疫组化染色及RT-PCR等方法了解肺组织中PPAR-β及Akt-1、核转录因子(NF)-κB、白细胞介素(IL)-6的表达。结果 (1)24 h死亡率:单纯手术组42.1%,低剂量组10%,高剂量组20%;48 h死亡率:单纯手术组27.3%,低剂量组16.7%,高剂量组50%。(2)RT-PCR:CLP术后24 h PPAR-β表达下调,使用GW501516后上调PPAR-β表达。CLP手术打击可上调IL-6、NF-κB炎症因子表达量,使用GW501516后IL-6、NF-κB表达量下调,Akt-1表达量上调。(3)HE染色:CLP手术打击后肺组织中大量炎性细胞浸润、肺间质水肿充血,GW501516处理组肺部炎性细胞浸润、间质水肿减轻。(4)免疫组化:使用GW501516后肺组织中PPAR-β阳性细胞增多。结论低剂量GW501516(0.25 mg/kg)可降低脓毒血症老龄大鼠早期死亡率,其机制与激活Akt-1、下调NF-κB有关。
【图文】：

显微镜下观察、照相。1.6统计学方法应用GraphPadPrism5.0软件，各组间比较使用onewayANOVA检验或t检验，不符合条件的使用non-parametric检验。各组间死亡率比较使用χ2检验，不符合条件的使用Fisher检验。2结果2.1死亡率CLP术后24h观察点，CLP组术后24h内死亡8只(42.1%);使用不同剂量GW501516盐水复苏后，CLP-LD组24h内死亡1只(10.0%)，CLP-HD组24h内死亡2只(20.0%)。以CLP术后48h观察点，CLP-48组48h内共死亡3只(27.3%);CLP-LD-48组48h内死亡1只(16.7%)，CLP-HD-48组48h内死亡3只(50.0%)。2.2肺组织HE染色见图1。CLP手术打击后肺组织中大量炎性细胞浸润、肺间质水肿充血，，GW501516处理组肺部炎性细胞浸润、间质水肿减轻。2.3PPAＲ-β免疫组化染色结果见图2。使用GW501516后肺组织中PPAＲ-β阳性细胞增多。2.4ＲT-PCＲ结果见表2。CLP术后24hPPAＲ-β表达下调，使用GW501516后上调PPAＲ-β表达。CLP手术打击可上调白细胞介素(IL)-6、核转录因子(NF)-κB等炎症因子表达量，使用GW501516后IL-6、NF-κB表达量下调，Akt-1表达上调。见表1。图1老龄大鼠肺组织HE染色(×400)图2老龄大鼠肺组织PPAＲ-β免疫组化染色(×200)表1各组间PPAＲ-β及各因子mＲNA半定量结果(x±s)指标CON组(n=5)CLP-24组(n=8)CLP-LD-24组(n=4)CLP-HD-24组(n=4)PPAＲ-β1.0000±0.42500.5057±0.46751.4260±0.26611.8680±0.0732Akt-10.9999±0.29160.9673±0.56711.8690±0.69550.7283±0.2214NF-κB1.0000±0.29351.3130±0.71101.0980±0.39921.4090±1.0550IL-60.9992±0.55841.4270±0.01461.0790±0.51310.6971±0.3497指标CLP-48组(n=11)CLP-LD-48组(n=6)CLP-HD-48组(n=6)NO-CLP-HD-48组(n=2)PPAＲ-β1.4160±0.98791.6370±0.84444.7270±2.8930

组间死亡率比较使用χ2检验，不符合条件的使用Fisher检验。2结果2.1死亡率CLP术后24h观察点，CLP组术后24h内死亡8只(42.1%);使用不同剂量GW501516盐水复苏后，CLP-LD组24h内死亡1只(10.0%)，CLP-HD组24h内死亡2只(20.0%)。以CLP术后48h观察点，CLP-48组48h内共死亡3只(27.3%);CLP-LD-48组48h内死亡1只(16.7%)，CLP-HD-48组48h内死亡3只(50.0%)。2.2肺组织HE染色见图1。CLP手术打击后肺组织中大量炎性细胞浸润、肺间质水肿充血，GW501516处理组肺部炎性细胞浸润、间质水肿减轻。2.3PPAＲ-β免疫组化染色结果见图2。使用GW501516后肺组织中PPAＲ-β阳性细胞增多。2.4ＲT-PCＲ结果见表2。CLP术后24hPPAＲ-β表达下调，使用GW501516后上调PPAＲ-β表达。CLP手术打击可上调白细胞介素(IL)-6、核转录因子(NF)-κB等炎症因子表达量，使用GW501516后IL-6、NF-κB表达量下调，Akt-1表达上调。见表1。图1老龄大鼠肺组织HE染色(×400)图2老龄大鼠肺组织PPAＲ-β免疫组化染色(×200)表1各组间PPAＲ-β及各因子mＲNA半定量结果(x±s)指标CON组(n=5)CLP-24组(n=8)CLP-LD-24组(n=4)CLP-HD-24组(n=4)PPAＲ-β1.0000±0.42500.5057±0.46751.4260±0.26611.8680±0.0732Akt-10.9999±0.29160.9673±0.56711.8690±0.69550.7283±0.2214NF-κB1.0000±0.29351.3130±0.71101.0980±0.39921.4090±1.0550IL-60.9992±0.55841.4270±0.01461.0790±0.51310.6971±0.3497指标CLP-48组(n=11)CLP-LD-48组(n=6)CLP-HD-48组(n=6)NO-CLP-HD-48组(n=2)PPAＲ-β1.4160±0.98791.6370±0.84444.7270±2.89303.1450±0.2464Akt-12.5250±1.30500.9107±0.39021.5830±0.62311.0090±0.0000NF-κB2.4420±2.50001.1760±0.48031.0810±0.42551.1980±0.5066

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