Caspase-1介导的细胞焦亡在脓毒症心肌损伤中的作用与机制研究

发布时间：2021-07-04 22:05

　　目的:探讨Caspase-1介导的细胞焦亡在脓毒症心肌损伤过程中的作用及其可能的作用机制。方法:1.雄性C57BL/6小鼠,6-8w,行盲肠穿刺结扎术（Cecal ligation and puncture,CLP）构建脓毒症模型,分别于造模后0h、8h、16h及24h取材,病理学检查评定小鼠心肌损伤程度。2.将6-8w雄性C57BL/6小鼠分为三组:对照组（control）、模型组（model）、干预组（intervention）,模型组行盲肠穿刺结扎术（CLP）构建脓毒症模型,对照组只做开腹探查,不做盲肠穿刺结扎,干预组行盲肠穿刺结扎术之前1小时先腹腔注射Caspase-1的抑制剂（Ac-YVAD-cmk）进行预处理,造模后24h小时取材,进行心肌苏木精-伊红染色法（Hematoxylin-eosin staining,HE）染色、透射及扫描电镜检查;用酶联免疫吸附测定法（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）比较三组小鼠心肌组织匀浆中IL-6、肌酸激酶同工酶（CK-MB）和肌钙蛋白I（cTn-I）等细胞因子的水平高低,用蛋白免疫印迹法（W... 

【文章来源】：皖南医学院安徽省

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

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小鼠脓毒症模型的制备

皖南医学院硕士学位论文23结果1小鼠造模后的表现与正常小鼠相比较，行CLP手术后的小鼠逐渐出现活动度下降，毛发光泽消失，食欲下降，并偶有出现寒战症状，眼部有明显分泌物，粪便不成型，呈稀便。而干预组小鼠的一般表现介于对照组和模型组之间。2小鼠心肌组织HE染色观察结果2.1按时间分组的小鼠心肌组织HE结果造模后0小时的小鼠心肌组织HE染色显示为正常心肌组织，细胞排列紧密，心肌细胞结构完整，闰盘结构可见，组织内无细胞水肿，也无炎性细胞浸润；造模后8小时后的小鼠心肌组织HE染色可见心肌组织大致正常，仅可见局部组织有水肿表现，心肌细胞结构基本完整，未见明显炎性细胞浸润；造模后16小时的小鼠心肌组织HE染色可见多处组织水肿，并有少量炎性细胞浸润，心肌组织间隙增宽，少量心肌细胞损伤；造模后24小时的小鼠心肌组织HE染色显示大片的心肌细胞损伤，组织内可见明显的炎性细胞浸润，组织间隙明显增宽。详见图2。0h8h16h24h图2造模后不同时间点小鼠心肌组织HE染色结果（HE×400）

皖南医学院硕士学位论文242.2按处理分组的小鼠心肌组织HE结果对照组小鼠心肌组织HE染色结果显示心肌组织正常，细胞结构完整，细胞内可见闰盘结构，组织中无水肿及炎性细胞浸润；模型组小鼠心肌组织HE染色结果显示心肌细胞排列紊乱，细胞结构破坏，心肌组织间隙明显增宽，组织中可见明显的细胞水肿及炎性细胞浸润；干预组小鼠心肌组织HE染色结果显示心肌组织局部水肿及炎性细胞浸润，可见少量心肌细胞的坏死。详见图3。对照组模型组干预组图3造模后24小时不同处理组小鼠心肌组织HE染色结果（HE×400）3小鼠心肌组织电镜切片结果3.1透射电镜的观察结果观察电镜照片可发现，对照组小鼠心肌细胞结构完整，细胞内线粒体形态正常，线粒体嵴结构可见；与对照组相比较，模型组小鼠心肌细胞膜的连续性被破坏，细胞内线粒体形态明显异常，线粒体嵴消失，同时细胞质内可见大量游离的白色空泡状的脂肪滴，说明线粒体功能受到影响；与模型组相比较，干预组小鼠心肌细胞膜的完整性较好，线粒体结构基本正常，偶有可见线粒体嵴结构破坏，细胞质内也可见游离脂滴，但数量较少。详见图4。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3265631